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文檔簡介
1、目的: 本實驗通過觀察維腦路通、精氨酸對結(jié)腸吻合口愈合的影響,研究吻合口愈合的促進(jìn)因素。 方法: 選用體重200~250g雄性wistar大白鼠15只,所有動物都喂以標(biāo)準(zhǔn)實驗大鼠全價顆粒飼料,自由飲水,適應(yīng)實驗室環(huán)境一周后進(jìn)入實驗。隨機分為三組,每組5只,所有大鼠術(shù)前、術(shù)后各肌注青霉素40萬單位。以10%水合氯醛(0.3ml/100g)腹腔注射麻醉。維腦路通組:行右半結(jié)腸切除,回腸—橫結(jié)腸端端吻合,用6/0無損傷
2、線,腸吻合口單層內(nèi)翻結(jié)節(jié)縫合4針,用4萬單位/100毫升的慶大霉素鹽水2毫升沖洗腹腔,用3/0絲線連續(xù)縫合關(guān)腹,術(shù)后24小時開始自由進(jìn)食、水,以維腦路通(15mg/kg/d)灌胃,連續(xù)3天;精氨酸組:手術(shù)方法同前,術(shù)后24小時開始自由進(jìn)食、水,以精氨酸(800mg/kg/d)灌胃,連續(xù)3天。對照組:手術(shù)方法同前,術(shù)后24小時自由進(jìn)食、水,不行任何處置,術(shù)后4天分別處死,進(jìn)行剖腹探查。檢查吻合口愈合情況,無滲漏者,游離結(jié)腸吻合段、切取4厘
3、米(吻合口在節(jié)段的中央),置于林格液中,行吻合口的爆破壓力測定:將腸段的一端與壓力測試儀連接,另一端縫接導(dǎo)管。導(dǎo)管另一端連接注射泵,以2ml/min的速度向腸段內(nèi)泵入亞甲藍(lán)注射液,同時監(jiān)測腔內(nèi)壓力。當(dāng)發(fā)生亞甲藍(lán)注射液泄漏的腔內(nèi)壓力為吻合口的爆破壓力,做以記錄。這個參數(shù)表明吻合口的機械強度(單位mmHg)。再行吻合口羥脯氨酸含量測定:將爆破壓力測量后、切除帶有吻合口的1cm腸段100mg,稱重,脫脂,脫水,加6mmol/L鹽酸110度水解
4、12小時,使所有氨基酸間肽鍵全部斷裂,取樣后氧化,加入羥脯氨酸顯示劑(10%過二甲氨基苯甲醛溶液)用紫外分光光度儀測定組織的羥脯氨酸含量。以微克羥脯氨酸每毫克組織(μg/mg)方式作為結(jié)果的計數(shù).病理學(xué)檢查:取吻合口處腸管至于10%中性甲醛中固定,常規(guī)石蠟包埋,切片厚度(4μm),蘇木精-伊紅染色,行光鏡檢查膠原細(xì)胞及纖維,比較組間差異。 結(jié)果: 術(shù)后4天,見各組均無吻合口瘺發(fā)生,可以完成測壓,精氨酸組、維腦路通組和對照
5、組吻合口爆破壓力分別為59.800±3.033mmHg、31.200±2.588mmHg和25.200±1.923mmHg三組間兩兩比較,均存在明顯統(tǒng)計學(xué)差異(P<0.01);精氨酸組、維腦路通組和對照組吻合口組織羥脯氨酸含量分別為6.053±0.227μg/mg,4.420±0.671μg/mg和4.092±0.179μg/mg,三組間兩兩比較,也存在明顯統(tǒng)計學(xué)差異(P<0.01),光鏡下(10或20倍)觀察見對照組吻合口膠原細(xì)胞及膠
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