大黃靈仙膠囊對(duì)慢性肝損傷性膽石病干預(yù)機(jī)制的臨床與基礎(chǔ)研究.pdf

1、目的:應(yīng)用四氯化碳誘導(dǎo)建立慢性肝損傷性膽石病大白兔模型，探討大黃靈仙膠囊對(duì)慢性肝損傷性膽石病模型肝損傷的干預(yù)療效，研究其防治、緩解肝損傷性膽石病的作用機(jī)制。
　　方法:
　　(1)臨床觀察:將符合肝損傷性膽石病患者75例，除正常用藥外，按照隨機(jī)、對(duì)照原則，分為治療組（大黃靈仙膠囊組）39例和對(duì)照組（清肝利膽膠囊組）36例。治療組給予口服大黃靈仙膠囊治療，對(duì)照組給予口服清肝利膽膠囊治療，療程3個(gè)月。治療結(jié)束后檢測(cè)血常規(guī)、肝功等

2、指標(biāo)，隨訪統(tǒng)計(jì)結(jié)石復(fù)發(fā)率，評(píng)價(jià)其療效、安全性。
　　(2)動(dòng)物實(shí)驗(yàn):a.參考金博的慢性肝損傷兔模型構(gòu)建方法，建立慢性肝損傷性、慢性肝損傷性膽石病大白兔模型，同時(shí)肝損傷膽石病大白兔模型各組投以高熱量、高膽固醇致石飼料，各組建立兔肝損傷模型。造模過(guò)程中死亡的實(shí)驗(yàn)兔立即取肝臟行病理學(xué)檢查。b.注射CCl4-橄欖油溶液12周后，通過(guò)病理及解剖確診動(dòng)物模型成功，將空白對(duì)照組、肝纖維化膽石病組和肝硬化膽石病組各半分開(kāi)，分為正常組、正常組+大黃

3、靈仙方組、肝纖維化兔膽石癥模型組、肝纖維化膽石病組+大黃靈仙方組、肝硬化兔膽石癥模型組、肝硬化膽石病組+大黃靈仙方組。正常組+大黃靈仙方組、肝纖維化膽石病組+大黃靈仙方組、肝硬化膽石病組+大黃靈仙方組每天灌胃中藥制劑大黃靈仙方0.4
　　g/kg·d，其余各組灌胃等量生理鹽水，各組大白兔均正常飼料飼養(yǎng)。在用藥后第12周，用10％水合氯醛將所有大白兔按照4ml/kg麻醉，取相同部位的肝臟組織，分別使用實(shí)時(shí)熒光定量PCR、免疫組化、肝

4、組織羥脯氨酸測(cè)定、病理技術(shù)及生化等方法檢測(cè)。
　　結(jié)果:
　　(1)臨床研究:
　?、倥c對(duì)照組相比，治療組肝功能各項(xiàng)指標(biāo)均出現(xiàn)不同程度的下降，在ALT、AST、GHO、TG、TBIL、DBIL、IBIL等都較治療前明顯改善（均為P＜0.05）;在治療后，治療組的療效均高于對(duì)照組，總有效率略高于對(duì)照組(P=0.047)。
　?、诖簏S靈仙膠囊未見(jiàn)明顯毒副作用或不良反應(yīng)。
　　(2)基礎(chǔ)研究:
　?、傺Ｒ?guī)

5、、生化:與對(duì)照組相比，治療組白細(xì)胞、中性粒細(xì)胞、淋巴細(xì)胞均明顯下降(P＜0.01);與對(duì)照組相比，治療組的ALT、AST、TBIL、DBIL、IBIL、GHO、TG等生化指標(biāo)均出現(xiàn)不同程度下降（均為P＜0.05）;
　?、诔Ｒ?guī)病理:與對(duì)照組相比，用藥各組光鏡下可見(jiàn)遭到破壞的肝小葉逐漸修復(fù)，部分肝細(xì)胞形態(tài)恢復(fù)正常，炎性細(xì)胞及纖維組織減少，區(qū)域呈點(diǎn)狀、片狀壞死明顯減少;
　?、勖庖呓M化:與對(duì)照組相比，喂食大黃靈仙顆粒劑的各組肝竇

6、、匯管區(qū)的肝細(xì)胞胞漿或胞膜上棕褐色顆粒沉積表達(dá)明顯減少，小膽管膽汁淤積減少，說(shuō)明用藥后肝損傷得到改善;
　　④PCR檢測(cè)結(jié)果:與對(duì)照各組相比，用藥各組的IL-6、EGR-1mRNA的表達(dá)量均有不同程度降低(P＜0.05);
　?、菖c對(duì)照相比，喂食大黃靈仙顆粒劑的各模型組羥脯氨酸含量均有不同程度降低(均為P＜0.05)，用藥的空白對(duì)照組未見(jiàn)明顯變化。
　　結(jié)論:大黃靈仙膠囊對(duì)肝損傷性膽石病有一定的緩解作用，在一定程度上促