早期宮頸癌及宮頸上皮內(nèi)瘤變中Ki-67、PCNA的表達(dá)及其與HPV感染相關(guān)性的研究.pdf

1、目的： 研究Ki-67抗原與增殖細(xì)胞核抗原(Proliferating cell nuclear antigen，PCNA)在早期宮頸癌及宮頸上皮內(nèi)瘤變(Cervical intraepithelial neoplasia，CIN)中的表達(dá)規(guī)律，并分析其與人乳頭瘤病毒(Homan papillary virus，HPV)感染的關(guān)系，探究三者聯(lián)合應(yīng)用的早期診斷價(jià)值。 方法： 本研究應(yīng)用免疫組織化學(xué)(Immunohi

2、stochemical assay，IHC)S-P法檢測宮頸病變組織中Ki-67抗原及PCNA抗原的表達(dá)，并結(jié)合臨床病理特點(diǎn)進(jìn)行分析。應(yīng)用HPV L1通用引物MY09/MY11行聚合酶鏈反應(yīng)(Polymerase chain reaction，PCR)檢測宮頸病變組織中HPV感染情況，并結(jié)合部分患者臨床HCⅡ檢測結(jié)果進(jìn)行比較。研究組包含CIN標(biāo)本37例，早期高分化宮頸鱗癌標(biāo)本18例。37例CIN標(biāo)本中包含CINI(LSIL)20例、CI

3、NⅡ/Ⅲ(HSIL)17例。18例早期宮頸癌標(biāo)本中含IA～I(xiàn)B期8例，ⅡA期10例。對照組為手術(shù)切除的慢性宮頸炎標(biāo)本15例。 結(jié)果： 1 Ki-67在宮頸組織中的表達(dá)與臨床病理特征的關(guān)系研究組宮頸鱗癌組織、CIN組織與對照組慢性宮頸炎組織中均可檢測到不同幾率的Ki-67抗原陽性表達(dá)。免疫組織化學(xué)檢測Ki-67抗原表達(dá)，陽性表現(xiàn)為增殖細(xì)胞核著棕黃色。研究組宮頸鱗癌組織中Ki-67陽性表達(dá)率為100﹪(18/18)，其中工期

4、和Ⅱ期均為100﹪陽性表達(dá)。CIN組織中Ki-67陽性表達(dá)率為為89.19﹪(33/37)。其中CINI和CINⅡ/Ⅲ組織中的Ki-67陽性表達(dá)率分別為85．00﹪(17/20)、94．12﹪(16/17)。在對照組慢性宮頸炎組織中，Ki-67陽性表達(dá)率為33．33﹪(5/15)。早期宮頸癌組織與慢性宮頸炎組織之間、CIN組織與慢性宮頸炎組織之間Ki-67陽性表達(dá)率，應(yīng)用卡方檢驗(yàn)，統(tǒng)計(jì)學(xué)上具有顯著差異(P<0.05)。檢驗(yàn)Ki-67陽性

5、表達(dá)率與宮頸各級病變嚴(yán)重程度的關(guān)系，在CINⅠ、CIN Ⅱ/Ⅲ和早期宮頸鱗癌工期ⅡA期之間，應(yīng)用卡方檢驗(yàn)，統(tǒng)計(jì)學(xué)上不具有顯著差異(P>0.05)。 進(jìn)一步比較Ki-67抗原在早期宮頸癌、CIN各級別與對照組慢性宮頸炎中的過表達(dá)率(＋＋～＋＋＋)，Ki-67抗原顯示在CINⅠ組與慢性宮頸炎相比不具顯著性差異(P>0.05)，而在CINⅡ/Ⅲ及宮頸癌Ⅰ期/ⅡA期與慢性宮頸炎相比差異顯著(P<0.01)。CINⅡ/Ⅲ組和早期宮頸癌各組

6、間不具顯著性差異(P>0.05)，而CINⅡ/Ⅲ組與CINⅠ組間差異顯著(P<0.05)。 2 PCNA在宮頸組織中的表達(dá)與臨床病理特征的關(guān)系研究組宮頸鱗癌組織、CIN組織與對照組慢性宮頸炎組織中均可檢測到不同幾率的PCNA抗原陽性表達(dá)。免疫組織化學(xué)檢測PCNA抗原表達(dá)，陽性表現(xiàn)為增殖細(xì)胞核著棕黃色。研究組宮頸鱗癌組織中PCNA陽性表達(dá)率為100﹪(18/18)，其中Ⅰ期和Ⅱ期均為100﹪陽性表達(dá)。CIN組織中：PCNA陽性表達(dá)

7、率為為97．30﹪(36/37)。其中CINⅠ和CINⅡ/Ⅲ組織中的PCNA陽性表達(dá)率分別為95．00﹪(19/20)、100.00﹪(17/17)。在對照組慢性宮頸炎組織中，PCNA陽性表達(dá)率為66．67﹪(10/15)。 早期宮頸癌組織與慢性宮頸炎組織之間、CIN組織與慢性宮頸炎組織之間PCNA陽性表達(dá)率，應(yīng)用卡方檢驗(yàn)，統(tǒng)計(jì)學(xué)上具有顯著差異(P<0.05)。檢驗(yàn)PCNA陽性表達(dá)率與宮頸各級病變嚴(yán)重程度的關(guān)系，在CINⅠ、CI

8、N Ⅱ/Ⅲ和早期宮頸鱗癌Ⅰ期/ⅡA期之間，應(yīng)用卡方檢驗(yàn)，統(tǒng)計(jì)學(xué)上不具有顯著差異(P>0.05)。 進(jìn)一步比較PCNA抗原在早期宮頸癌、CIN各級別與對照組慢性宮頸炎中的過表達(dá)率(＋＋～＋＋＋)，PCNA抗原顯示在CINⅠ組與慢性宮頸炎相比不具顯著性差異(P>0.05)，而在CINⅡ/Ⅲ及宮頸癌Ⅰ期/ⅡA期與慢性宮頸炎相比差異顯著(P<0.01)。CINⅡ/Ⅲ組和早期宮頸癌各組間不具顯著性差異(P>0.05)，而CINⅡ/Ⅲ組與C

9、INⅠ組間差異顯著(P<0.01)。 3宮頸病變組織中K-67及PCNA表達(dá)之間的相關(guān)性Spearman等級相關(guān)分析顯示：Ki-67、PCNA的表達(dá)強(qiáng)度存在正相關(guān)關(guān)系，等級相關(guān)系數(shù)rs=0．6565。P<0.01。 4 HPV在早期宮頸癌和CIN中的感染與臨床病理特征的聯(lián)系研究組宮頸鱗癌組織、CIN組織與對照組慢性宮頸炎組織中均可檢測到不同幾率的人乳頭瘤病毒感染。PCR檢測HPV表達(dá)，研究組宮頸鱗癌組織中HPV陽性表達(dá)率

10、為100﹪(18/18)，其中工期和Ⅱ期均為100﹪陽性表達(dá)。CIN組織中HPV陽性表達(dá)率為72.97﹪(20/37)。其中ClNI和CINⅡ/Ⅲ組織中的HPV陽性表達(dá)率分別為30.00﹪(6/20)、82.35﹪(14/17)。在對照組慢性宮頸炎組織中，HPV陽性表達(dá)率為13.33﹪(2/15)。 早期宮頸癌組織與慢性宮頸炎組織之間、CIN組織與慢性宮頸炎組織之間HPV陽性表達(dá)率，應(yīng)用卡方檢驗(yàn)，統(tǒng)計(jì)學(xué)上具有顯著差異(P<.05

11、)。比較HPV在早期宮頸癌、CIN各級別與對照組慢性宮頸炎中的感染率，HPV感染率在CINI組與慢性宮頸炎相比不具顯著性差異(P>0.05)，而在CINⅡ/Ⅲ及宮頸癌Ⅰ期/ⅡA期與慢性宮頸炎相比差異顯著(P<0.01)。CINⅡ/Ⅲ組和早期宮頸癌各組間不具顯著性差異(P>0.05)，而CINⅡ/Ⅲ組與CINI組間差異顯著(P<0.01)。 結(jié)合其中33例患者(含浸潤癌工期5例，CINⅡ/Ⅲ 12例，CINI10例，慢性宮頸炎6例

12、)臨床HCⅡ檢測結(jié)果進(jìn)行比較分析，除2例PCR HPV-DNA陽性的CINI及1例早期浸潤癌的HCⅡ檢查結(jié)果提示陰性外，其余HCⅡ結(jié)果與本研究相符。 5 Ki-67及PCNA表達(dá)與HPV感染之間的相關(guān)性Spearman等級相關(guān)分析顯示，HPV感染與Ki-67的表達(dá)強(qiáng)度存在正相關(guān)關(guān)系，等級相關(guān)系數(shù)rs=0.6072，P<0.05。HPV感染與PCNA的表達(dá)強(qiáng)度存在正相關(guān)關(guān)系，等級相關(guān)系數(shù)rs=0.7835，P<0.05。

13、結(jié)論： Ki-67、PCNA抗原表達(dá)均反映了宮頸上皮增殖性病變的發(fā)生，其強(qiáng)陽性表達(dá)與宮頸高度鱗狀上皮內(nèi)病變(High grade squamous．intraepithelial lesion，HSIL)與早期宮頸癌顯著相關(guān)。Ki-67、PCNA抗原的強(qiáng)陽性表達(dá)在HSIL與早期宮頸癌之間、低度鱗狀上皮內(nèi)病變(Low grade squamous intraepithelial lesion，LSIL)與慢性宮頸炎之間無顯著差異，

14、但在HSⅡ與LSIL之間表達(dá)差異顯著。Ki-67、PCNA的表達(dá)強(qiáng)度存在正相關(guān)關(guān)系。HPV陽性表達(dá)提示宮頸癌前病變的潛在危險(xiǎn)性，與HSIL與早期宮頸癌顯著相關(guān)。HPV陽性率在HSIL與早期宮頸癌之間、LSIL與慢性宮頸炎之間無顯著差異，但在HSIL與LSIL之間表達(dá)差異顯著。Ki-67、PCNA的表達(dá)與HPV感染率在宮頸病變組織中存在相關(guān)性。聯(lián)合檢測宮頸鱗癌組織中Ki-67、PCNA的過表達(dá)率有助于判斷細(xì)胞的增殖活性，可作為早期診斷宮頸