田間灰飛虱對不同類型殺蟲劑的抗藥性研究.pdf

1、灰飛虱是一種重要水稻害蟲，化學(xué)防治是控制其發(fā)展的一種有效方式，及時了解田間抗性水平及抗性機制是化學(xué)防控的重要舉措，本研究分別對7個地區(qū)的田間灰飛虱進行抗性監(jiān)測，代謝抗性機理分析，潛在靶標(biāo)序列克隆及變異分析，以期為灰飛虱田間有效化學(xué)防控提供新視角。
　　1.采用浸苗法分別對江蘇建湖(JH)、南京(NJ)、姜堰(JY)、溧陽(LY)、上海(SH)、東北長春(DB)、安徽廬江(LJ)灰飛虱種群的毒死蜱、噻嗪酮、噻蟲嗪、吡蚜酮四種殺蟲劑抗

2、性水平進行監(jiān)測，以室內(nèi)多年不接觸殺蟲劑的云南楚雄敏感種群為對照。結(jié)果顯示:吡蚜酮和噻嗪酮田間各灰飛虱種群的抗性水平較高，華東地區(qū)灰飛虱種群對噻嗪酮抗性水平均大于100倍，其中LY對噻嗪酮抗性高達156倍，而抗性水平相對較低的DB種群也達26倍;各個地理種群對吡蚜酮抗性水平介于18-34倍之間，且DB種群與華東各地區(qū)之間灰飛虱對吡蚜酮抗性水平無差異;另外，毒死蜱和噻蟲嗪抗性水平較低，抗性水平均小于10倍。從地理角度分析，DB灰飛虱種群對四

3、種殺蟲劑抗性水平較低，屬于相對敏感或者抗性初始發(fā)展時期。此外，分別在各個地理種群灰飛虱中測定了多功能氧化酶增效劑(PBO)、谷胱甘肽-S-轉(zhuǎn)移酶增效劑(DEM)和羧酸酯酶增效劑(TPP)對四種殺蟲劑的增效作用。結(jié)果顯示:在LJ種群中，TPP對噻嗪酮呈現(xiàn)4.8倍的增效作用;在灰飛虱LY種群中，DEM對噻蟲嗪表現(xiàn)2.0增效作用;在灰飛虱JY種群中，DEM對吡蚜酮表現(xiàn)2.1倍的增效作用。除此之外，各種群對三大解毒酶系的增效作用總體上不顯著，這

4、些結(jié)果也初步表明不同用藥背景下田間灰飛虱抗性機制的復(fù)雜性。對不同地理種群灰飛虱抗性產(chǎn)生機制需進一步探究。
　　2.對代謝因子表達分析發(fā)現(xiàn):以灰飛虱JY、LY、NJ、DB種群為材料，以室內(nèi)敏感品系（YN）為對照，對灰飛虱三大解毒基因定量分析發(fā)現(xiàn):灰飛虱羧酸酯酶Ls.CarE1、Ls.CarE14、Ls.CarE15、細胞色素P450基因CYP305和CYP6CW1和谷胱甘肽-S-轉(zhuǎn)移酶Ls.GSH7在田間種群中均存在過量表達。其中，

5、灰飛虱JY種群中Ls.CYP6CW1和LS.CYP18A1相對表達量最高，分別為22.24倍和9.73倍;LY種群中Ls.CarE1、Ls.GSH7、LS.CYP6CW1和LS.CYP302A1v2相對表達量最高，分別為11.67倍、14.98倍、14.96倍和14.27倍;灰飛虱NJ種群中Ls.CarE1、Ls.CarE14、LS.CYP6CW1和Ls.CYP4G76的相對表達量最高，分別為6.56、4.99、8.87和4.42倍;灰

6、飛虱DB種群中，Ls.CarE11、Ls.GSH7、Ls.CYP4G76基因的表達量最高，分別有4.82、7.13和6.37倍。這些結(jié)果初步表明:解毒代謝因子過量表達可能與殺蟲劑的抗性相關(guān)，還需進一步研究。
　　3.本文在深度轉(zhuǎn)錄組測序的基礎(chǔ)上，通過序列驗證共發(fā)現(xiàn)18條乙酰膽堿受體基因，其中8條具有完整的編碼框。其分別屬于α1、α2、α3、α4、α5、α6、α8、β1亞基，進一步對吡蟲啉抗感灰飛虱個體間α2亞基序列分析發(fā)現(xiàn)其核苷酸