大連口岸媒介生物抗藥性監(jiān)測及殺蟲劑合理使用研究.pdf

1、研究背景:媒介生物是指直接或間接傳播人類疾病的生物，主要有蚊、蠅、鼠、蚤等八大類。蚊類是重要的媒介生物之一，全世界已知約3000余種。雌蚊刺叮吸血，傳播20余種蟲媒傳染病，如瘧疾、登革熱和登革出血熱、流行性乙型腦炎、黃熱病、絲蟲病等。據(jù)統(tǒng)計全球每年瘧疾的發(fā)病人數(shù)達3～5億，死亡人數(shù)約為150～300萬。蠅類全世界已知約7萬余種。蠅類可傳播錐蟲病，并且可以攜帶脊髓灰質(zhì)炎病毒、霍亂弧菌、寄生蟲卵等多種病原體，蠅類的幼蟲還可以寄生在人或脊椎動

2、物體內(nèi)而引起蠅蛆癥。目前，隨著擬除蟲菊酯殺蟲劑的大規(guī)模使用，媒介生物對殺蟲劑逐漸產(chǎn)生了抗藥性。自然種群中主要媒介生物如蚊、蠅等對殺蟲劑的抗藥性高達數(shù)十倍至數(shù)百倍。連續(xù)使用后令殺蟲劑使用劑量不斷加大，濃度不斷提高，自八十年代進入中國用于衛(wèi)生害蟲防治，至今在某些地區(qū)的使用濃度已經(jīng)提高1000多倍，該狀況不但增加了殺蟲劑的使用成本，同時也帶來一系列的生態(tài)問題。因此抗藥性監(jiān)測與殺蟲藥物的合理應用，對于媒介生物的防治意義非常重大。
　　目的

3、:本課題研究口岸媒介生物抗藥性監(jiān)測技術，對口岸地區(qū)媒介生物進行快速抗藥性檢測，在此基礎上研究殺蟲劑的合理使用，從而減少用藥的盲目性，降低環(huán)境污染，并將此監(jiān)測技術與防制方法進行推廣，提高口岸地區(qū)媒介生物防治效率。
　　研究方法:本課題采集大連口岸蚊蠅類媒介生物為主要研究對象，通過野外現(xiàn)場采集、實驗室標準化養(yǎng)殖、抗藥性生物學測試和除蟲菊酯殺蟲劑擊倒抗性（等位基因特異性PCR)分子檢測等方法，對大連西山屯、大連灣、藍天集裝箱場、大窯灣等

4、地區(qū)蚊蠅類媒介生物進行快速抗藥性檢測，在此基礎上研究殺蟲劑的合理使用，從而減少用藥的盲目性，降低環(huán)境污染，并將此監(jiān)測技術與防治方法進行推廣，提高口岸地區(qū)媒介生物防治效率。蚊類使用抗藥性生物學測試方法中的浸漬法進行實驗，通過計算半數(shù)致死率(LC50)，比較蚊類對幾種殺蟲劑的敏感度，從而找到敏感度相對高的殺蟲劑進行蚊類滅殺;蠅類使用抗藥性生物學測試方法中的掛籠法進行實驗，比較蠅類對幾種殺蟲劑的敏感度，并且檢測家蠅對敵敵畏抗藥性。蚊蠅均使用等

5、位基因特異性PCR進行抗藥性分子生物學檢測，通過計算突變基因的概率，檢測蚊蠅抗藥性情況。
　　結果:利用浸漬法對淡色庫蚊及幼蟲進行抗藥性毒力測試，結果大連的3個地理株對溴氰菊酯敏感度相對較高，對敵敵畏的抗性最高。殘殺威應用較多，蚊類產(chǎn)生較明顯的抗藥性，應替換使用其他類的殺蟲劑。掛籠法實驗結果表明，列喜鎮(zhèn)對大連地區(qū)的媒介生物具有較好的殺滅效果，家蠅對其敏感性要高于淡色庫蚊，可以應用其殺滅口岸家蠅。應用家蠅對敵敵畏抗藥性快速檢測的方法

6、對大連地區(qū)的家蠅進行抗藥性檢測，結果乙酰膽堿脂酶抑制實驗陽性率（包括弱陽性）91.2％，說明大連地區(qū)的家蠅種群對有機磷殺蟲劑敵敵畏普遍產(chǎn)生抗藥性。在口岸上使用有機磷類殺蟲劑時應該慎重。建立特異性等位基因PCR方法，檢測不同種群擬除蟲菊酯類殺蟲劑擊倒抗性（kdr)基因頻率，結果大連地區(qū)三個地理株的淡色庫蚊各50組樣品，其中藍天集裝箱場kdr基因頻率為19.0％;西山屯(2009年)kdr基因頻率為19.8％;西山屯(2010年)kdr基因

7、頻率為20.0％;大連灣kdr基因頻率為19.1％。說明大連口岸淡色庫蚊對擬除蟲菊酯類藥物已經(jīng)產(chǎn)生抗藥性，可更換其他藥物進行替換擬除蟲菊酯類殺蟲劑。大連的3個地理株家蠅中，藍天集裝箱場、大窯灣檢測出kdr抗性雜合子基因型，其kdr基因頻率分別為5％、1％，另外1個種群未發(fā)現(xiàn)抗性基因，該類藥物可繼續(xù)使用。
　　結論:通過本項目的各項檢測結果，提出以下殺蟲劑合理使用措施:大連口岸殺滅淡色庫蚊應該采用敏感性較高的幾種擬除蟲菊酯類殺蟲劑輪