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文檔簡介
1、靜脈血栓栓塞癥(venousthromboembolism,VTE)包括肺血栓栓塞癥(pulmonarythromboembolism,PTE)和深靜脈血栓形成(deepvenousthrombosis,DVT)。PTE患者約70﹪可發(fā)現(xiàn)DVT的證據(jù)。DVT患者約30﹪發(fā)生無癥狀或隱形的PTE。一些細(xì)胞因子參與VTE發(fā)病過程已受到廣泛重視。血管內(nèi)皮生長因子(Vascularendothelialgrowthfactor,VEGF)具有誘
2、導(dǎo)血管生成及增加微血管通透性的生物活性,并可能在血栓溶解過程起一定作用。本文旨在建立模擬臨床VTE的實(shí)驗動物模型,制作不同階段DVT栓子的PTE模型,研究PTE肺組織的VEGF變化。 目的:建立大鼠VTE模型,觀察不同階段DVT栓子制作的PTE的病理和VEGF變化。 方法:1)Sprague-Dawley大鼠144只,雌雄各半,隨機(jī)分為DVT組(18只)、DVT-PTE組(54只)和假手術(shù)(Sham)組(72只)。DVT
3、組依據(jù)血栓形成持續(xù)時間(1天、4天、7天)不同分為DVT1、DVT4、DVT7三組,每組6只;DVT-PTE組依據(jù)DVT時間(1天、4天、7天)不同和肺血栓栓塞后時間(1天、4天、7天)不同分為DVT1-PTE1、DVT1-PTE4、DVT1-PTE7、DVT4-PTE1、DVT4-PTE4、DVT4-PTE7、DVT7-PTE1、DVT7-PTE4、DVT7-PTE7九組,(簡稱D1P1、D1P4、D1P7、D4P1、D4P4、D4P
4、7、D7P1、D7P4、D7P7),每組6只。Sham組依據(jù)上述相應(yīng)時間分為十二組,每組6只。手術(shù)阻滯實(shí)驗組大鼠的左股靜脈形成DVT,DVT造模成功后依據(jù)上述不同時間段取出股靜脈栓子于右股靜脈注入制成PTE模型。2)測定各組動脈血?dú)狻?)血栓及肺組織切片HE染色觀察血栓及肺組織不同時間變化,4)采用免疫組織化學(xué)檢測肺組織VEGF表達(dá)部位,Western-blot、RT-PCR方法檢測VEGF蛋白及mRNA的表達(dá)。5)應(yīng)用計量資料以mea
5、n±SD表示,組間比較采用多因素方差分析和非參數(shù)檢驗,并行相關(guān)和交互作用分析,P<0.05為差異有顯著性。 結(jié)果:1.DVT組18只大鼠模型成功率100﹪,術(shù)后無死亡。DVT-PTE組術(shù)后D1P1組12小時死亡1只,解剖證實(shí)死亡原因為大面積PTE。DVT術(shù)后1天患肢腫脹發(fā)生率21﹪,2-3天自行緩解。DVT后7天左下肢股靜脈血管鞘周圍有層狀、厚度約1m的纖維板樣組織。2.DVT-PTE組PTE后均出現(xiàn)呼吸急促、心率加快。D4P4
6、、D4P7、D7P1、D7P4和D7P7組PaO2降低,與sham組比較差異有顯著性。3.免疫組化結(jié)果Sham組支氣管上皮細(xì)胞可見VEGF表達(dá),DVT-PTE后1天肺泡上皮可見VEGF表達(dá),第4天肺動脈內(nèi)皮可見VEGF表達(dá)。DVT4-7天的栓子栓塞肺動脈后可見機(jī)化的栓子有VEGF表達(dá)。DVT-PTE后肺組織VEGFmRNA及蛋白表達(dá)在第1天即升高,并達(dá)峰值(P<0.05),第4-7天仍升高,但蛋白表達(dá)第7天與Sham組比較差異不顯著(P
7、>0.05),DVT組肺組織VEGFmRNA及蛋白表達(dá)量與Sham組比較差異無顯著性(P>0.05)。 結(jié)論:1.血管夾阻斷一側(cè)股靜脈血流成功建立DVT模型,再經(jīng)另一側(cè)股靜脈注入自體血栓可制成理想的DVT-PTE模型,是符合VTE病理生理的理想模型。2.DVT不同時期血栓栓子的性質(zhì)可直接影響PTE血栓的轉(zhuǎn)歸(溶解、機(jī)化、再通或繼發(fā)血栓形成)和低氧血癥的程度;影響肺組織的病理改變。3.PTE后肺組織中VEGF表達(dá)增加。VEGF與纖
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