二苯乙烯苷對小鼠海馬依賴性學(xué)習(xí)記憶的影響及機(jī)制.pdf

1、文章從以下兩部分就二苯乙烯苷對小鼠海馬依賴性學(xué)習(xí)記憶的影響及機(jī)制進(jìn)行了綜述。
　　第一部分二苯乙烯苷對小鼠海馬依賴性學(xué)習(xí)記憶的影響
　　目的:隨著我國老齡化速度不斷增快,阿爾茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)、帕金森病(Parkinson’s disease,PD)及血管性癡呆(vascular dementia,VD)等衰老相關(guān)的神經(jīng)退行性疾病的研究、預(yù)防和治療已成為刻不容緩的問題。何首烏作為一種從我

2、國古代沿用至今的抗衰老名貴中藥,其主要活性成分是具有多酚結(jié)構(gòu)的二苯乙烯苷(tetrahydroxystilbene glucosid,THSG)。近來有研究發(fā)現(xiàn),THSG可明顯改善衰老大鼠和APP轉(zhuǎn)基因AD模型鼠的學(xué)習(xí)記憶能力。本實(shí)驗(yàn)室前期研究也發(fā)現(xiàn)THSG可促進(jìn)小鼠的海馬突觸可塑性。本實(shí)驗(yàn)旨在從行為學(xué)角度研究慢性給予THSG對小鼠正常學(xué)習(xí)記憶能力的影響。
　　方法:將C57BL小鼠分為四組(對照組:生理鹽水,NS;低劑量組:TH

3、SG20 mg/kg;中劑量組:THSG40 mg/kg;高劑量組:THSG80 mg/kg),連續(xù)灌胃給藥一個(gè)月。通過行為學(xué)和離體場電位實(shí)驗(yàn)來觀察THSG對小鼠正常學(xué)習(xí)記憶的影響。
　　結(jié)果:在各組小鼠的痛域和焦慮狀態(tài)無明顯區(qū)別的情況下,THSG給藥可明顯增強(qiáng)小鼠的情景性條件恐懼的記憶能力,呈劑量依賴性變化。新物體認(rèn)知實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn), THSG給藥組動物對新物體的探索時(shí)間和探索頻率均明顯高于對照組,且呈劑量依賴性增加。腦片場電位記錄結(jié)

4、果顯示,相對于生理鹽水對照組,THSG明顯易化小鼠海馬區(qū)長時(shí)程增強(qiáng)(long-term potentiation,LTP),且呈劑量依賴性改變。
　　結(jié)論:慢性灌胃給予THSG可明顯增強(qiáng)小鼠海馬區(qū)LTP和學(xué)習(xí)記憶能力。
　　第二部分二苯乙烯苷增強(qiáng)小鼠海馬依賴性學(xué)習(xí)記憶的機(jī)制
　　目的:THSG對學(xué)習(xí)記憶的增強(qiáng)作用已在細(xì)胞和動物水平上得到證實(shí),其機(jī)制研究雖略有涉及,但并不深入。近來研究表明,micro Ribonucle

5、ic Acid(miRNA)在學(xué)習(xí)記憶和神經(jīng)精神精神疾病中發(fā)揮重要作用。THSG能顯著影響小鼠的學(xué)習(xí)記憶行為,是否也與其調(diào)節(jié)miRNA有關(guān)呢?本實(shí)驗(yàn)旨在從學(xué)習(xí)記憶相關(guān)的蛋白激酶和基因水平研究并確定 THSG促進(jìn)學(xué)習(xí)記憶的作用靶點(diǎn),進(jìn)一步探討 THSG改善認(rèn)知功能的機(jī)制,為THSG作為促智藥應(yīng)用提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
　　方法:通過 western bloting及real-time qantitative polymerase chain

6、 reaction(real-time qPCR)技術(shù),觀察慢性灌胃給予THSG對小鼠海馬區(qū)蛋白表達(dá)及miR-134表達(dá)的影響;通過高爾基染色觀察其對海馬區(qū)樹突棘密度的影響。
　　結(jié)果:Western bloting結(jié)果顯示,與生理鹽水對照組相比,THSG明顯增加海馬沉默信息調(diào)節(jié)因子類型1(silent information regulator type1,SIRT1)的表達(dá)。Real-time qPCR檢測發(fā)現(xiàn)給藥組miR-1

7、34的表達(dá)明顯低于對照組,且與SIRT1表達(dá)呈負(fù)相關(guān)。此外,THSG給藥組的磷酸化 cAMP反應(yīng)元件結(jié)合蛋白(phospho-cAMP response element binding protein,p-CREB)和腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子(brain-derived neurotrophic factor, BDNF)的表達(dá)均增加;磷酸化細(xì)胞外信號激酶( phospho-extracellular signal-regulated kin

8、ases, p-ERK)和磷酸化鈣/鈣調(diào)蛋白激酶(phospho-calcium/calmodulin-dependent protein kinase Ⅱ,p-CaMKⅡ)的表達(dá)亦增加。高爾基染色結(jié)果顯示,THSG組小鼠海馬區(qū)樹突棘密度明顯增加。
　　結(jié)論:THSG可促進(jìn)SIRT1的表達(dá),抑制miR-134表達(dá),另外,THSG也能激活ERK和CaMKII,并進(jìn)一步激活CREB,增加BDNF的表達(dá),從而增強(qiáng)學(xué)習(xí)記憶能力。高爾基染色