兒童哮喘與喘息性支氣管炎的基因多態(tài)性研究.pdf

1、目的： ①通過對喘息性支氣管炎和兒童哮喘的β2-腎上腺素能受體(β2-AR)基因核苷酸第46、79位點(diǎn)突變導(dǎo)致第16、27位氨基酸多態(tài)性頻率的分析，及對各位點(diǎn)突變基因型的血漿總IgE和嗜酸性粒細(xì)胞(EOS)計(jì)數(shù)的特點(diǎn)分析，從分子水平探討兩病的相關(guān)性，為哮喘的早期診斷提供分子生物學(xué)依據(jù)。 ②尋找喘息性支氣管炎患兒日后繼發(fā)兒童哮喘的高危因素，為嬰幼兒哮喘的早期干預(yù)提供依據(jù)。 方法：研究對象均來源于我院兒科住院及門診就

2、診的患兒，哮喘組：2006年10月至2007年9月之間，217例哮喘患兒均為急性發(fā)作期，其中男性135例，女性82例，年齡最大17歲，最小1.1歲，平均5.5歲，其中有嬰幼兒哮喘35人。喘支組：共119例，均為2006年10月至2007年2月之間就診，其中男78人，女41人：年齡最大2.9歲，最小0-3歲，平均1.8歲。對照組為本院兒保門診健康兒童，50例，其中男32例，女18例，年齡最小2歲，最大13歲，平均4.9歲。所有研究對象均為

3、重慶藉，漢族兒童。收集各組患兒及健康兒詳細(xì)的回顧性問卷調(diào)查，問卷涉及既往反復(fù)喘息的病史及就診情況、個人過敏史(濕疹、過敏性鼻炎、食物藥物過敏等)、家族史(父母哮喘及過敏史、二級親屬哮喘及過敏史等)及母乳喂養(yǎng)情況。采用PCR-限制性核酸內(nèi)切酶分析法檢測β2-AR16、27位點(diǎn)基因多態(tài)性，比較三組研究對象β2-AR16、27位的基因型頻率及等位基因頻率；用ELISA法檢測血漿總IgE，對三組的血漿總IgE均值進(jìn)行比較分析，對每組中各基因型的

4、血漿總IgE均值的差異進(jìn)行比較；外周血嗜酸性粒細(xì)胞計(jì)數(shù)采用伊紅染色法，由本院檢驗(yàn)科實(shí)驗(yàn)室計(jì)數(shù)。對喘息性支氣管炎患兒追蹤隨訪12個月，根據(jù)隨訪結(jié)果，分析影響喘支日后繼發(fā)哮喘的危險因素。 結(jié)果： ①兒童哮喘組β2-AR第16位點(diǎn)基因型頻率：Arg/Arg0.37，Arg/Gly0.51，Gly/Gly0.12，與健康人群對照組比較差異無顯著性(P＞0.05)；Gly等位基因頻率為0.37，與健康人群對照組比較，差異無顯著性(

5、P＞0.05)；喘息性支氣管炎組β2-AR.第16位點(diǎn)基因型頻率：Arg/Arg0.35，Arg/Gly0.48，Gly/Gly0.17，與健康對照組比較差異無顯著性(P＞0.05)，與哮喘組比較差異也無顯著性；Gly等位基因頻率為0.41，與對照組及哮喘組比較均無顯著性差異(P＞0.05)。哮喘組第27位點(diǎn)基因頻率：Gln/Gln0.25，Gln/Glu0.55，Glu/Glu0.20，Glu/Glu基因型頻率明顯低于對照組(P＜0.

6、05)；Glu等位基因頻率為0.48，明顯低于對照組(P＜0.05)；喘支組27位點(diǎn)基因頻率：Gln/Gln0.24，Gln/Glu0.50，Glu/Glu0.26，與對照組無顯著差異，與哮喘組也無顯著性差異(P＞0.05)；喘支組Glu等位基因頻率為0.51，與對照組及哮喘比較均無顯著性差異(P＞0.05)； ②哮喘組血漿總IgE和外周血EOS計(jì)數(shù)均高于喘支組和正常對照組(P＜0.05)，喘支組的總IgE和外周血EOS計(jì)數(shù)都明

7、顯高于對照組(P＜0.05)； ③β2-AR基因16位點(diǎn)各基因型間的血漿總IgE水平差異無顯著性(P＞0.05)；哮喘和喘支組27位點(diǎn)中Gln/Gln基因型的總IgE水平都明顯高于Gln/Glu及Glu/Glu基因型(P＜0.05)，Gln/Glu和Glu/Glu基因型之間的IgE水平無顯著差異(P＞0.05)。 ④對119例喘息性支氣管炎追蹤隨訪12個月，成功隨訪的有108例，其中有66例(61.11％)有明確喘息又發(fā)

8、作兩次以上，可診斷為兒童哮喘，為哮喘組；有42例(38.89％)喘支的患兒這12個月未再有喘息發(fā)作，仍診斷為喘息性支氣管炎，為未再發(fā)作組。對7種危險因素進(jìn)行分析，單因素分析：個人濕疹史、個人過敏史、母親過敏史、父親過敏史、母乳不足4個月與喘支發(fā)展為嬰幼兒哮喘有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。Logistic分析示：個人濕疹史(OR=2.820，95％CI:1.107～7.184，P＜0.05)、個人過敏史(OR=2.756，95％CI:1.097～6.92

9、5，P＜0.05)、母親過敏史(OR=2.860，95％CI:1.070～7.642，P＜0.05)、母乳不足4個月(OR=2.901，95％CI:1.176～7.155，P＜0.05)是喘支發(fā)展為嬰幼兒哮喘的危險因素。哮喘患兒的血漿總IgE和外周血EOS計(jì)數(shù)均明顯高于未再發(fā)作喘息患兒(P＜0.05)。 結(jié)論： ①β2-AR基因第16位點(diǎn)基因多態(tài)性與兒童哮喘和喘息性支氣管炎的發(fā)病無關(guān)聯(lián)；在β2-AR基因27位點(diǎn)與喘息性支

10、氣管炎與支氣管哮喘有相關(guān)性，尤其是具有Gln/Gln基因型和Gln等位基因的喘支與哮喘的關(guān)系更為密切； ②血漿總IgE水平和外周血EOS計(jì)數(shù)升高不僅是哮喘免疫病理變化指標(biāo)，也是喘支忠兒的特征，喘息性支氣管炎具有和哮喘相似的病理過程； ③喘支與哮喘一樣，27位點(diǎn)Gln/Gln基因型的血漿總IgE值都明顯高于其它基因型，故對于具有27位點(diǎn)的Gln/Gln基因型且血漿總IgE增高的喘支與哮喘的關(guān)系更為密切。 ④喘息性支