小毛莨內(nèi)酯對(duì)脊柱結(jié)核兔模型病灶組織中IL-6,TNF-a和TGF-β的影響.pdf

1、結(jié)核病為一慢性可治愈但死亡率最高之傳染病，特別是脊柱結(jié)核的發(fā)病率與日俱增。近年來耐藥及多重耐藥菌株(multiple drugs resistant- bacilus tuberculosis,MDR- TB)的出現(xiàn),更是對(duì)現(xiàn)有的抗結(jié)核藥物提出了嚴(yán)重挑戰(zhàn)，尋找新的抗結(jié)核藥，尤其是抗結(jié)核中藥已成為研究方向。有研究顯示IL-6、TNF-a和TGF-β在結(jié)核病變轉(zhuǎn)歸過程中起到重要作用，發(fā)現(xiàn)貓爪草與抗結(jié)核藥物結(jié)合可以提高療效，縮短療程，且沒有產(chǎn)

2、生毒副作用，還能提高患者的免疫力，但目前其機(jī)制不明。
　　目的：觀察小毛莨內(nèi)酯對(duì)脊柱結(jié)核兔病灶組織中白細(xì)胞介素-6（IL-6），腫瘤壞死因子（TNF-a），轉(zhuǎn)化生長因子-β（TGF-β）的表達(dá)水平的影響，探討其治療脊柱結(jié)核的作用機(jī)制。
　　方法：將未成年兔腰4椎體鉆孔植入結(jié)核標(biāo)準(zhǔn)菌株 H37Rv，建立兔脊柱結(jié)核模型。將20只新西蘭未成年兔隨機(jī)分成4組，每組5只。A組，脊柱結(jié)核造模組，不予以任何干預(yù)治療；B組，小毛莨內(nèi)酯治療組

3、，即脊柱結(jié)核造模后給予小毛莨內(nèi)酯灌胃治療；C組：常規(guī)抗癆藥治療組，脊柱結(jié)核造模后予以常規(guī)抗癆藥灌胃治療；D組：常規(guī)抗癆藥聯(lián)合小毛莨內(nèi)酯治療組，脊柱結(jié)核造模后分別予以常規(guī)抗癆藥及小毛莨內(nèi)酯灌胃治療；8周后，取病灶組織，進(jìn)行 HE染色和肉眼組織學(xué)觀察，實(shí)時(shí)熒光定量PCR反應(yīng)法及免疫印跡法分別檢測小毛莨內(nèi)酯及常規(guī)三聯(lián)抗癆藥治療前后脊柱結(jié)核兔病灶組織中IL-6、TNF-α、TGF-β的mRNA和蛋白表達(dá)水平的變化。結(jié)果應(yīng)用 SPSS16.0統(tǒng)計(jì)

4、軟件，進(jìn)行方差分析（on way ANOVA），分析各組間差異， P<0.05表示差異性顯著。
　　結(jié)果：新西蘭白兔腰椎進(jìn)行H37Rv結(jié)核桿菌感染后，結(jié)核病灶組織HE染色顯示組織間有膿細(xì)胞、類上皮樣細(xì)胞或壞死灶等形成，經(jīng)小毛莨內(nèi)酯、常規(guī)抗撈藥以及聯(lián)合用藥治療8周后，結(jié)核病灶區(qū)膿細(xì)胞、類上皮樣細(xì)胞數(shù)量顯著減少；實(shí)時(shí)熒光定量 PCR反應(yīng)監(jiān)測腰椎結(jié)核病灶組織中脊柱結(jié)核造模組的IL-6、TNF-α、TGF-βmRNA相對(duì)表達(dá)量與小毛莨內(nèi)酯

5、治療組、常規(guī)抗撈藥治療組及常規(guī)抗撈藥聯(lián)合小毛莨內(nèi)酯治療組相比較有顯著差異（P<0.05），脊柱結(jié)核兔模型經(jīng)過治療后病灶組織中IL-6、TNF-α、TNF-αmRNA表達(dá)明顯降低。常規(guī)抗撈藥聯(lián)合小毛莨內(nèi)酯治療組的IL-6、TNF-α、TGF-βmRNA相對(duì)表達(dá)量與小毛莨內(nèi)酯治療組及常規(guī)抗撈藥治療組相比較有顯著差異（P<0.05）,且常規(guī)抗撈藥聯(lián)合小毛莨內(nèi)酯治療組中IL-6、TNF-α、TGF-βmRNA的相對(duì)表達(dá)量最低，提示采用常規(guī)抗撈藥

6、聯(lián)合小毛莨內(nèi)酯治療后，更能降低組織中IL-6、TNF-α、TGF-βmRNA的表達(dá)水平；免疫印跡法檢測各組椎旁軟組織中IL-6、TNF-α、TGF-β的蛋白表達(dá)水平與熒光定量PCR檢測結(jié)果類似。
　　結(jié)論：
　　1.小毛莨內(nèi)酯可以有效降低脊柱結(jié)核兔模型病灶組織中炎癥相關(guān)因子 IL-6， TNF-a的表達(dá)水平，減輕炎性反應(yīng)，降低TGF-β的表達(dá)水平，抑制病灶中肉芽組織形成。
　　2．小毛莨內(nèi)酯對(duì)常規(guī)抗結(jié)核藥治療結(jié)核病有協(xié)