補中益氣湯對大鼠創(chuàng)傷應激反應中ACTH和IL-2、IL-6調(diào)理作用的實驗研究.pdf

1、目的：大鼠重度創(chuàng)傷刺激后，觀察大鼠的創(chuàng)傷應激反應情況和創(chuàng)傷應激對大鼠神經(jīng)-內(nèi)分泌-免疫方面的影響；并通過補中益氣湯對創(chuàng)傷大鼠治療調(diào)理后，觀察比較其體內(nèi)ACTH和IL-2、IL-6含量的變化，闡述補中益氣湯對創(chuàng)傷大鼠應激激素、細胞因子的作用機理，總結補中益氣湯調(diào)理應激反應的細胞分子機制，用中醫(yī)方法為調(diào)控應激反應探索新的思路，為臨床上進一步合理應用補益類中藥治療調(diào)理應激反應提供理論和實驗依據(jù)。
　　方法：健康清潔SD大鼠45只，月齡為

2、1.5-2月，體重180-220g，雌雄各半，據(jù)隨機數(shù)字表隨機分為A、B、C三組，其中A組（n=15）為空白對照組、B組（n=15）為模型對照組、C組（n=15）為藥物治療組。將B、C組大鼠，清醒狀態(tài)下造模，將大鼠背位固定于木板后，左下肢股骨中段位置放置一醫(yī)用長金屬鑷子,從柄部算起,大約將1/4部放置于大鼠大腿處（股骨中段位置）,以近20 cm高度自由垂直落下500g重法碼，砸擊鑷子,借助間接力的作用制成左下肢股骨閉合性骨折。大鼠有骨折

3、的典型表現(xiàn)，包括大鼠左下肢大腿處畸形腫脹，手摸有明確骨摩擦感，失去雙下肢運動和支撐功能。造模后1h開始分別給A組、B組經(jīng)胃灌注生理鹽水，給C組經(jīng)胃灌注補中益氣湯，每次灌胃藥量約為0.5ml，早晚各一次。于造模后第6h、1d、3d、5d、7d、10d經(jīng)眼內(nèi)眥靜脈或股靜脈抽取大鼠體內(nèi)靜脈血，高速離心沉淀后留取血漿，冰箱4℃低溫保存，用ELISA法檢測記錄各組大鼠創(chuàng)傷應激后體內(nèi)促腎上腺皮質(zhì)激素（ACTH）和白細胞介素2（IL-2）、白細胞介素

4、6（IL-6）的含量，觀察大鼠在遭受重度創(chuàng)傷后經(jīng)過補中益氣湯的治療調(diào)理，應激反應的一般情況和應激激素和細胞因子的水平變化，并與正常組和模型組進行比較對照。
　　結果：實驗前后各組大鼠體重比較：A組和C組實驗末與實驗前大鼠體重比較差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05），而 B組大鼠實驗末與實驗前體重差異比較無統(tǒng)計學差異（P＞0.05）。
　　不同時間點3組大鼠ACTH水平的變化結果：A組ACTH在傷后6h、1d、3d、5d、7d、1

5、0d時與實驗前相比略有升高，但各時間點與實驗前差異均無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）；B組ACTH表現(xiàn)為傷后應激一開始即顯著升高，并且在傷后6h、1d、3d連續(xù)長時間維持在高水平（P＜0.01），在傷后5d、7d、10呈逐漸下降趨勢，但仍高于與A組同時間點的含量（P＜0.05）；C組在經(jīng)過應用補中益氣湯干預調(diào)理后ACTH含量的增幅明顯得到抑制，各時間點 ACTH含量均低于 B組（P＜0.05），尤其在傷后5d、7d、10d的ACTH含量降低

6、到正常組水平，與A組同時間點比較無比較差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。
　　不同時間點3組大鼠IL-2、IL-6含量均數(shù)比較結果：A組IL-2、IL-6在傷后在各時間點呈略微增高，但與實驗前比較無統(tǒng)計學意義（aP＞0.05）。B組IL-2在創(chuàng)傷6h就降為最低，且回升緩慢；IL-6在傷后增幅顯著，但在峰值表現(xiàn)在第1d、3d，在傷后第5d、7d、10d逐漸降低（aP＜0.01或 aP＜0.05）。（bP＜0.01）。C組經(jīng)過補中益氣

7、湯調(diào)理后，對IL-2的降低和IL-6的升高均有顯著控制作用，尤其表現(xiàn)為對IL-2的降低和IL-6升高的雙向削峰作用，使之不至太過，與B組同時間點比較差異有顯著性（bP＜0.01, cP＜0.05)，在傷后第10d，IL-2和IL-6幾乎恢復至正常，與A組對照無統(tǒng)計學意義（dP＞0.05）
　　結論：補中益氣湯能在細胞分子水平有效調(diào)理創(chuàng)傷大鼠應激反應發(fā)生發(fā)展的整個過程，顯著影響其體內(nèi)應激激素和細胞因子的含量，改善創(chuàng)傷后大鼠的一般生存