組織芯片結合免疫組化研究人胃癌Galectin-3和VEGF的表達及其臨床意義.pdf

1、目的:應用組織芯片技術結合免疫組化鏈霉素抗生物素蛋白-過氧化酶法(Streptavidin Perioxidase,SP)探討胃癌組織中半乳糖凝集素-3(Galectin-3)和血管內(nèi)皮生長因子蛋白(vascular eradothelial growthfactor,VEGF)的表達及其臨床意義,以及它們與胃癌臨床病理特征之間的關系,進一步探討它們之間的相關性及兩者與胃癌侵襲轉(zhuǎn)移和預后的關系。
　　 方法:101例胃癌組織標本

2、為2003年1月到2004年6月間南昌大學第二附屬醫(yī)院胃癌根治術手術切除標本,術前均未行放療和化療,術后病理論斷為胃癌,并記錄其完整的臨床病理資料。TNM分期:Ⅰ A期6例,Ⅰ B期7例,Ⅱ期19例,ⅢA期31例,ⅢB期18例,Ⅳ期20例。另取20例距腫瘤邊緣5cm以上正常胃黏膜組織做對照。采用組織芯片技術建立101例胃癌組織及20例正常胃黏膜組織的組織芯片,每張組織芯片上有20-25個樣本,以4×5或5×5組織微陣列排列,外形為圓形或

3、類圓形。對組織芯片蠟塊進行4μm厚連續(xù)切片,每10張切片取1張進行HE染色以鑒別組織學類型是否仍具有代表性,并且采用免疫組織化學SP法檢測Galectin-3和VEGF蛋白在胃癌及正常胃黏膜組織中的表達。用SPSS17.0統(tǒng)計軟件包進行統(tǒng)計分析,以p值為0.05作為具有統(tǒng)計學意義的標準。
　　 結果:
　　 1、本實驗制備組織芯片蠟塊5塊,結果顯示在全部深約3mm的陣列蠟塊里,幾乎所有標本均能保持它們的組織學類型特征,較

4、少出現(xiàn)皺褶和掉片現(xiàn)象。
　　 2、Galectin-3陽性顆粒在細胞核、細胞質(zhì)都有表達,主要表達于細胞質(zhì)；胃癌組織中Galectin-3的陽性表達率為85.1％(86/101),明顯高于正常胃黏膜組織35.0％(7/20)(p<0.05)。Galectin-3在胃癌中的表達與胃癌浸澗深度、淋巴結轉(zhuǎn)移和遠處轉(zhuǎn)移以及臨床分期明顯相關(p<0.05),而與患者年齡、性別、分化程度無顯著性意義(p>0.05)。
　　 3、VEG

5、F陽性顆粒主要表達于細胞質(zhì),少數(shù)表達于細胞核。胃癌組織中VEGF的陽性表達率為76.2％(77/101),明顯高于正常胃黏膜組織25.0％(5/20)(p<0.05)。VEGF在胃癌中的表達與胃癌浸潤深度、淋巴結轉(zhuǎn)移和遠處轉(zhuǎn)移以及臨床分期明顯相關(p<0.05),與患者年齡、性別、分化程度無顯著性意義(p>0.05)。
　　 4、Spearman相關性檢驗顯示,Galectin-3和VEGF之間存在顯著性關系。r's=0.484

6、3,p<0.05,提示二者之間呈正相關。
　　 5、101例胃癌患者因客觀因為失訪12例,隨訪到89例,于5年內(nèi)復發(fā)轉(zhuǎn)移47例,死亡36例,胃癌組織中Galectin-3陽性表達率為97.2％(35/36),明顯高于生存期大于5年者77.4％(41/53)(p<0.05)；VEGF陽性表達率為94.4％(34/36),明顯高于生存期大于5年者79.2％(42/53)((p<0.05)。提示胃癌組織中Galectin-3和VEGF

7、陽性表達患者,在5年內(nèi)復發(fā)、轉(zhuǎn)移者居多,生存期大于5年者少。
　　 結論:
　　 1、組織芯片具有高通量、多樣本、省時省力、降低誤差、便于設計實驗對照、可與其他多種生物技術相結合等多種優(yōu)點,在腫瘤早期診斷,療效判斷及預后預測的分子標志物篩選方面有重大的實用價值和應用前景。
　　 2、Galectin-3與VEGF蛋白的表達與胃癌的侵襲生長和轉(zhuǎn)移有顯著相關性。
　　 3、Galectin-3與V:EGF蛋白