體內(nèi)轉染腺病毒載體Ad-CMV-hTGF-β1對兔椎間盤退變保護作用的研究.pdf

1、　　目的：探究體內(nèi)轉染腺病毒載體Ad/CMV-hTGF-β1對兔椎間盤退變的保護作用，主要是對椎間盤髓核細胞中Ⅰ型、Ⅱ型膠原和成纖維細胞生長因子(FGF)的表達的影響，并初步討論其可能的作用機制，為椎間盤退變的生物學預防與治療提供理論基礎。方法：純種成年新西蘭大白兔20只，隨機分為實驗組和對照組，每組10只。采取腹部手術入路，逐層切開軟組織，暴露腰椎間盤，用微量注射器取本院骨科實驗室構建的腺病毒為載體的Ad/CMV-hTGF-β1(滴度

2、為6x106pfu)20微升直接注射于腰4，5椎間盤髓核內(nèi)；對照組僅進行相應的外圍手術操作，椎間盤未做任何處理。手術后3周取出椎間盤組織，常規(guī)石蠟包埋，組織切片，通過普通HE染色觀察髓核組織細胞學形態(tài)；用免疫組織化學方法染色顯示各組椎間盤組織髓核細胞中Ⅰ型、Ⅱ型膠原含量的變化和成纖維細胞生長因子(FGF)的表達情況；并用VIDAS圖象分析系統(tǒng)進行半定量分析。結果：普通HE染色結果顯示2組椎間盤髓核組織形態(tài)基本相同。免疫組織化學染色顯示：

3、實驗組椎間盤髓核細胞內(nèi)Ⅰ型膠原的表達比對照組低，OPTDM值分別為實驗組0.1804±0.0211，對照組0.2768±0.0161，統(tǒng)計學比較差異有顯著性(P＜0.05)；Ⅱ型膠原的表達結果則正好相反，實驗組比對照組高，OPTDM值分別為實驗組0.6936±0.0312，對照組0.5068±0.0235，統(tǒng)計學比較差異有顯著性(P＜0.05)；實驗組椎間盤髓核細胞FGF的表達比對照組高，OPTDM值分別為實驗組0.4354±0.019