端粒重復序列結合因子1在非小細胞肺癌的表達及臨床意義.pdf

1、研究背景及目的： 肺癌是目前世界上最常見的惡性腫瘤之一，并居于惡性腫瘤死亡率的第一位，是嚴重威脅人們健康和生命的疾病。而非小細胞肺癌(rlon-small cell lung carcinoma，NSCLC)占所有肺癌的80-85％，因此非小細胞肺癌的病因研究有重要意義。目前，肺癌的致病因素和發(fā)病機制尚不完全清楚，但在端粒及端粒酶與腫瘤的關系有了較深入的研究，端粒是真核細胞染色體末端由DNA重復序列和多種結合蛋白組成的特殊保護性

2、結構。端粒異常將導致染色體不穩(wěn)定，而染色體的不穩(wěn)定性與細胞衰老和腫瘤密切相關。端粒功能豐要依靠端粒長度和端粒結構的保持，端粒酶是細胞維持端粒長度的最主要途徑，許多證據(jù)顯示端粒長度和結構的維持及端粒酶活性受到一組端粒結合蛋白的調控。由Chong等首次發(fā)現(xiàn)的第一個人端粒重復序列結合因子1(telomeric repeat bind-ing factor 1，TRFl)是端粒長度的負調控因子，通過干擾端粒酶與染色體末端的結合，間接的對端粒長度

3、進行調控。已經有研究表明TRF1在很多腫瘤細胞的表達情況及與臨床的關系，但是TRFl在非小細胞肺癌組織中的表達情況研究的很少。本研究目的是檢測TRF1在非小細胞肺癌組織中的表達情況及與病理、臨床的關系，為臨床診治及預后判斷提供幫助。 對象與方法： 用EnVision免疫組織化學染色法檢測40例NSCLC患者手術切除后石蠟包埋標本及對照組37例癌旁正常肺組織TRFl的表達情況，分析其與NSCLC臨床、病理及患者牛存期的關系

4、。所有病例均來自于浙江省臺州醫(yī)院肺癌住院病人手術切除標本，經組織病理學診斷為原發(fā)性非小細胞型支氣管肺癌。其中男25例，女性15例，年齡為(41-74)歲，平均年齡為(55±7.8)歲。其中鱗狀細胞癌22例，腺癌13例，肺泡細胞癌3例，腺鱗癌1例，大細胞癌1例。按UICC1997年肺癌術后病理分期(pathological tumor，nodes，metastasis-claSSification，pTNM)標準：Ⅰ期9例，Ⅱ期16例，Ⅲ

5、a期12例，Ⅲb期3例。40例原發(fā)性支氣管肺癌中伴淋巴結轉移的肺癌23例。 所有石蠟包埋組織標本均制成4μm厚連續(xù)石蠟切片，常規(guī)脫蠟至水化。采用EnV—ision法行免疫組織化學染色。用己知的陽性肺癌組織切片同時同一條件下染色作為陽性對照，用PBS代替一抗作為陰性對照。TRFl陽性顆粒主要分別在腫瘤細胞的胞漿，以細胞漿出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性顆粒。而陰性的表現(xiàn)為腫瘤細胞的胞漿和核均不著色。由兩名病理醫(yī)生分別計數(shù)其中的陽性細胞數(shù)和

6、總細胞數(shù)，取其平均值，按陽性細胞所占總細胞的百分比來打分：O分為陰性，1分為陽性細胞≤10％，2分為11％-50％，3分為>50％，對于≥2分的認為免疫反應陽性。并分析TRFl表達的陽性率與臨床、病理及患者生存期的關系。 統(tǒng)計學方法采用SPSSll．0軟件包進行統(tǒng)計學分析，組間各計數(shù)資料采用X2檢驗進行顯著性檢驗，P<0.05為有統(tǒng)計學意義，并用KaplanMeier進行生存分析。 結果： 1.肺癌及癌旁正常組織

7、中TRFl表達情況：肺癌組織TRFl蛋白表達陽性率為57.5％，而肺癌旁正常組織TRFl蛋白表達陽性率為8.1％，兩者比較P<0.01，有顯著性差異。 2.TRFl蛋白的表達與NsCLC臨床病理特征的關系：鱗癌TRFl陽性率為59.1％，腺癌TRFl陽性率為53.8％；而在其他類型TRFl陽性率為60％，三者無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。并且在性別、年齡、是否長期吸煙、腫瘤大小、淋巴結是否轉移、病理TNM分期、分化程度等的對比中

8、均無顯著差異(P>0.05)。 3.NscLc組織TRFl的表達與總生存率的關系：TRFl表達陽性的NsCLC患者總生存率為60.9％，TRFl表達陰性的NsCLC患者總生存率為64.7％。兩者無顯著性差異(P>0.05)。 結論： 1.TRFl在NsCLC組織中表達的陽性率明顯高于癌旁正常組織。 2.TRFl的表達與NsCLC的組織學類型、性別、年齡、是否長期吸煙、腫瘤大小、淋巴結是否轉移、病理TNM分