潔澤凝膠對小鼠陰道內(nèi)環(huán)境影響的實驗研究.pdf

1、本研究分為二部分：
　　 第一部分：潔澤凝膠對小鼠陰道pH值、產(chǎn)H2O2乳桿菌、陰道粘膜刺激性及陰道和宮頸組織形態(tài)學影響的實驗研究
　　 目的：
　　 通過觀察使用潔澤一號凝膠、潔澤二號凝膠前后，對小鼠陰道pH值、產(chǎn)過氧化氫乳桿菌、陰道和宮頸組織病理形態(tài)學變化及陰道粘膜的刺激性，評價一次性使用潔澤復方凝膠對小鼠陰道酸性環(huán)境、嗜酸乳桿菌及陰道和宮頸的影響。
　　 方法：
　　 1.陰道pH值檢測方法

2、：
　　 2.產(chǎn)H2O2乳桿菌檢測方法：
　　 3.粘膜刺激實驗及組織形態(tài)學觀察：
　　 以上18個組中，每組隨機選取5只小鼠，解剖取出陰道、宮頸組織，進行HE染色，觀察組織形態(tài)學變化。
　　 結果：
　　 1 .陰道pH值
　　 (1)生理鹽水和藥物凝膠pH值:生理鹽水、空白凝膠、潔澤一號凝膠高中低劑量、潔澤二號凝膠高中低劑量、10[％]N-9凝膠的pH均值分別為：6.0、5.3、5.4

3、、5.6、5.4、5.8、6.2、5.3、5.3。
　　 (2)給藥前后自身對照結果:24h亞組：正常組、空白凝膠組、潔澤一號各劑量組、潔澤二號低中劑量組，任意一組給藥后24h陰道pH值與給藥前相比，差別無統(tǒng)計學意義。其中，潔澤二號高劑量組陰道pH值給藥前和給藥24h后相比，差別有顯著性統(tǒng)計學意義；10[％]N-9組陰道pH值給藥前和給藥24h后的相比，統(tǒng)計學差異有極顯著性意義。
　　 72h亞組：正常組、空白凝膠組、潔

4、澤一號高中低劑量組、潔澤二號高中低劑量組、10[％]N-9組任意一組給藥后72h pH值與給藥前相比，差別均無統(tǒng)計學意義。
　　 (3)給藥前后組間比較結果: 24h亞組：正常組、空白凝膠組、潔澤一號高中低劑量組、潔澤二號高中低劑量組、10[％]N-9組給藥前陰道pH值任意兩組相比，差別無統(tǒng)計學意義。
　　 各組給藥后24h陰道pH值比較中，空白凝膠組與正常組相比，差別無統(tǒng)計學意義；潔澤一號高中低劑量組、潔澤二號高中低劑

5、量組pH值分別與正常組、空白凝膠組相比，差別無統(tǒng)計學意義，10[％]N-9組pH值分別與正常組、空白凝膠組相比，差別有極顯著性意義；潔澤二號高劑量組陰道pH均值比潔澤一號低劑量組、潔澤二號低劑量組高，低于10[％]N-9組，與它們的差別均有顯著性統(tǒng)計學意義，其他潔澤凝膠組，潔澤一號高中低劑量組，潔澤二號高中劑量組，5組間任意兩組pH值相比差別無統(tǒng)計學意義。72h亞組：正常組、空白凝膠組、潔澤一號高中低劑量組、潔澤二號高中低劑量組、10[

6、％]N-9組給藥前陰道pH值任意兩組相比，差別無統(tǒng)計學意義。
　　 以上各組給藥后72h陰道pH值任意兩組相比，差別無統(tǒng)計學意義。
　　 2.乳桿菌菌落計數(shù)
　　 給藥后24h：在各組菌落計數(shù)均數(shù)相比較中，空白凝膠組與正常組菌落數(shù)相比，差別無統(tǒng)計學意義。潔澤一號中劑量組菌落數(shù)與正常組、空白凝膠組相比差別無統(tǒng)計學意義，潔澤二號中劑量組較正常組菌落數(shù)目少，相比差異有統(tǒng)計學顯著性意義，潔澤二號中劑量組菌落數(shù)與空白凝膠組

7、相比，差別無統(tǒng)計學意義，10[％]N-9組與正常組、空白凝膠組相比菌落數(shù)明顯減少，統(tǒng)計有極顯著性差異；潔澤一號中劑量組菌落數(shù)比潔澤二號中劑量組多，相比差別無統(tǒng)計學意義；潔澤一號中劑量、潔澤二號中劑量組與10[％]N-9相比菌落數(shù)明顯增多，統(tǒng)計學差別有極顯著意義。
　　 給藥后72h：在各組菌落計數(shù)均數(shù)相比較中，正常組、空白凝膠組、潔澤一號中劑量、潔澤二號中劑量組任意兩組菌落數(shù)比較，差別均無統(tǒng)計學意義；以上各組菌落數(shù)均比10[％]

8、N-9組多，統(tǒng)計學差別有極顯著性意義。
　　 正常組、空白凝膠組、潔澤一號中劑量組、潔澤二號中劑量組、10[％]N-9組各藥物組給藥后24h的菌落計數(shù)均數(shù)，分別與自身給藥后72h的相比較，差別均無統(tǒng)計學意義。
　　 3. 陰道粘膜刺激性和陰道、宮頸組織形態(tài)學
　　 (1)一次性用藥后陰道粘膜刺激性結果：給藥后24h，正常組、空白凝膠組、潔澤一號各劑量組和潔澤二號低劑量組粘膜刺激評分均小于0.5，對陰道粘膜無刺激性

9、；潔澤二號高中劑量兩組、10[％]N-9組評分大于0.5對陰道有輕度刺激性，但10[％]N-9分值1.14遠高于潔澤二號高中劑量兩組，刺激程度稍重。
　　 (2)陰道、宮頸組織病理學結果：陰道組織病理學結果：10[％]N-9組在給藥后24h亞組中，見2例陰道組織粘膜下充血和水腫，輕度炎性細胞浸潤；其他3例陰道組織與正常組相比均未見明顯異常。給藥后72h亞組中，見2例小鼠陰道組織有炎性細胞浸潤和充血，其他3例陰道組織與正常組相比均

10、未見明顯異常。
　　 宮頸組織病理學結果：空白凝膠組、潔澤一號各劑量組、潔澤二號各劑量組各組給藥后24h和72h亞組中，宮頸組織形態(tài)與正常組相比無明顯異常。10[％]N-9組給藥后24h亞組中有1例宮頸組織見粘膜下炎性細胞浸潤，其他4例和給藥后72h亞組宮頸組織與正常組相比無明顯異常。
　　 結論：
　　 一次性使用潔澤一號，潔澤二號凝膠對小鼠陰道pH值無明顯影響，一次性使用10[％]N-9凝膠后可使陰道pH值升

11、高，用藥72h后恢復尚可。
　　 第二部分：潔澤凝膠對小鼠陰道過氧化氫濃度、過氧化氫酶活力影響的實驗研究
　　 目的：
　　 觀察一次性使用潔澤一號中劑量、潔澤二號中劑量凝膠對小鼠陰道分泌物中過氧化氫濃度和組織粘膜中過氧化氫酶活力的干預作用；評價潔澤凝膠對小鼠陰道內(nèi)環(huán)境中H2O2濃度、CAT活力的影響。
　　 方法：
　　 陰道H2O2濃度和CAT活力觀察方法：取雌性昆明小鼠100只隨機分為0.9

12、％Nacl溶液組(正常組)、空白凝膠組、潔澤一號中劑量組，潔澤二號中劑量組，10[％]N-9凝膠組，每組設給藥后24h,72h兩個亞組。每只小鼠皮下注射生理劑量的苯甲酸雌二醇(E2)2ug，72h后，小鼠陰道分別注入上述各藥物凝膠20ul，正常組注射等量的生理鹽水，分別于給藥后24h或72h取陰道灌洗液，采用分光光度法檢測H2O2濃度變化，并脫臼處死，取陰道組織，勻漿、蛋白定量，采用分光光度法檢測單位蛋白CAT活力。
　　 結果

13、：
　　 1.陰道H2O2濃度：
　　 給藥后24h：在各組 H2O2濃度均數(shù)比較中，空白凝膠組、潔澤一號中劑量組H2O2濃度與正常組相比較，差別無統(tǒng)計學意義(P>0.05)，潔澤二號中劑量組、10[％]N-9組H2O2濃度低于與正常組，相比有顯著性統(tǒng)計學差異(P＜0.05)；潔澤一號中劑量組H2O2濃度與空白凝膠組相比較，差別無統(tǒng)計學意義(P>0.05)，潔澤二號中劑量組H2O2濃度與空白凝膠組相比較低，相比有顯著性

14、統(tǒng)計學差異(P＜0.05)，10[％]N-9組H2O2濃度比空白凝膠組低，相比有極顯著性統(tǒng)計學差異(P＜0.01)；潔澤二號中劑量組H2O2濃度比潔澤一號中劑量低，兩者差別無統(tǒng)計學意義(P>0.05)；潔澤二號中劑量組H2O2濃度高于10[％]N-9組，相比差別無統(tǒng)計學意義(P>0.05)，10[％]N-9組H2O2濃度比潔澤一號中劑量組的低，相比差別有極顯著統(tǒng)計學意義(P＜0.01)。
　　 給藥后72h：在各組 H2O2濃度

15、均數(shù)比較中，空白凝膠組、潔澤一號中劑量組H2O2濃度與正常組相比較，差別無統(tǒng)計學意義(P>0.05)，潔澤二號中劑量組、10[％]N-9組H2O2濃度與正常組相比較低，差異均有顯著性意義(P＜0.05)；潔澤一號中劑量組H2O2濃度與空白凝膠組相比較，差別無統(tǒng)計學意義(P>0.05)，潔澤二號中劑量組H2O2濃度與空白凝膠組相比較低，差別有顯著性意義(P＜0.05)，10[％]N-9組H2O2濃度比空白凝膠組低，相比有極顯著性差異(P＜

16、0.01)；潔澤二號中劑量組H2O2濃度比潔澤一號中劑量低，兩者差別無統(tǒng)計學意義(P>0.05)；潔澤二號中劑量組H2O2濃度高于10[％]N-9組，相比差別無統(tǒng)計學意義(P>0.05)，10[％]N-9組H2O2濃度比潔澤一號中劑量組的低，相比有極顯著性統(tǒng)計學差異(P＜0.01)。
　　 正常組、空白凝膠組、潔澤一號中劑量組、潔澤二號中劑量組、10[％]N-9組各藥物組給藥后24h的H2O2濃度均數(shù)，分別與自身給藥后72h的相

17、比較，差別均無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。
　　 2. CAT活力觀察結果
　　 給藥后24h：正常組、空白凝膠組、潔澤一號中劑量、潔澤二號中劑量組、10[％]N-9組任意兩組CAT活力均值相比均無統(tǒng)計學差異(P>0.05)。
　　 給藥后72h：正常組、空白凝膠組、潔澤一號中劑量、潔澤二號中劑量組、10[％]N-9組任意兩組CAT活力均值相比，差異均無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。
　　 正常組、空白凝膠

18、組、潔澤一號中劑量組、潔澤二號中劑量組、10[％]N-9組各藥物組給藥后24h的CAT活力均值，分別與自身給藥后72h的相比較，差別均無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。
　　 結論：
　　 一次性使用潔澤一號中劑量凝膠對小鼠陰道中H2O2濃度無明顯影響，一次性使用10[％]N-9凝膠明顯降低H2O2濃度，給藥后72h，濃度尚不能恢復；一次性使用潔澤二號中劑量凝膠能輕度降低陰道H2O2濃度，降低程度與10％N-9相比較低，雖給