無菌大鼠的人工培育及相關(guān)實(shí)驗研究.pdf

1、浙江大學(xué)博士學(xué)位論文無菌大鼠的人工培育及相關(guān)實(shí)驗研究姓名：王建國申請學(xué)位級別：博士專業(yè)：內(nèi)科學(xué)（傳染病學(xué)）指導(dǎo)教師：李蘭娟20060201浙江大學(xué)博士研究生學(xué)位論文不銹鋼無菌動物隔離器。1930年Glls幽son設(shè)計了第二代不銹鋼隔離器，1959年宮川【6J用不銹鋼做隔離器的主體部分，并安裝了小的玻璃觀察窗和靈敏的機(jī)械手，使不銹鋼隔離器達(dá)到比較完善的地步。但這種隔離器既笨重造價又昂貴，不能大量推廣使用，因而也限制了無菌動物工作的開展。1

2、957年美國印第安納州圣母大學(xué)Lobund實(shí)驗室的Tr嘲erm】發(fā)明了塑料薄膜隔離器，用無毒聚氯乙烯薄膜制造隔離器的主體部分來阻擋細(xì)菌的侵入。與不銹鋼隔離器相比，塑料薄膜隔離器有兩大優(yōu)點(diǎn)：1、可以進(jìn)行更加精細(xì)的操作，如血管插管等：2、價格明顯降低，可以在更多的實(shí)驗室進(jìn)行無菌動物的使用和研究。塑料薄膜容易加工成各種樣式的隔離器，滅菌方法也較為簡便，可以用液體殺菌劑如過氧乙酸進(jìn)行表面滅菌。無菌動物體內(nèi)外不攜帶任何生物體，飼育于和外界隔離的裝

3、置，這樣排除生物對于實(shí)驗結(jié)果的干擾，明顯提高了實(shí)驗的敏感性、重復(fù)性。有利于對生命活動基本規(guī)律的研究和分析，己在生物、醫(yī)學(xué)等方面有廣泛的應(yīng)用。我們承擔(dān)了國家973項目——移植器官慢性失功的免疫學(xué)應(yīng)用基礎(chǔ)研究中器官移植術(shù)后微生態(tài)失衡與移植物抗宿主病的關(guān)系及干預(yù)研究的工作。本課題旨在研究肝移植術(shù)后免疫抑制情形下腸道菌群的變化規(guī)律、腸道菌群抗原與腸道免疫活性細(xì)胞的相互作用和免疫應(yīng)答的機(jī)制、腸壁屏障功能的變化特點(diǎn)，及其在移植物免疫排斥、慢性失功中

4、的作用，探索通過重建、優(yōu)化腸道微生態(tài)提高肝移植術(shù)后腸道免疫功能、修復(fù)腸壁屏障功能繼而延長移植物存活時間和改善患者生存質(zhì)量的新思路和新途徑。課題需要建立無菌大鼠、悉生大鼠的動物模型來進(jìn)行深入研究肝移植術(shù)后單株菌、二聯(lián)菌和三聯(lián)菌對于免疫系統(tǒng)是否會發(fā)揮作用。第一部分無菌大鼠生存環(huán)境建立優(yōu)化和新型哺乳裝置的研制目的：探討環(huán)境的控制與無菌大鼠污染細(xì)菌機(jī)會的關(guān)系，以及自行研制的新型哺乳裝置在人工喂乳大鼠中的試驗效果。方法：1對屏障設(shè)施進(jìn)行嚴(yán)格消毒和