中藥復方0326的研究.pdf

1、復方0326是我室自行研制的中藥復方，經(jīng)初步藥理學試驗具有一定抗艾滋病、抗腫瘤活性，并能提高機體免疫力。本課題選用本復方為研究對象，以抗艾滋病效果為評價指標，以HPLC指紋圖譜分析方法為主，對復方顆粒劑進行質(zhì)量控制研究。本復方中藥由當歸、蛇床子、白及、黃連四味藥材組成，主要指標性成分為阿魏酸、蛇床子素、黃連素、多糖等。主要研究內(nèi)容及結(jié)果如下： 提取方法：固定提取條件，先將四味中藥分別提取，計算提取率，解決中藥復方在提取過程中提取

2、率波動引起的含量變化導致藥效不穩(wěn)定的問題。當歸、黃連、蛇床子三味中藥分別采用60％乙醇回流提取，再用水煮提，白及采用滲漉法提取。 有效成分HPLC指紋圖譜及含量測定：根據(jù)提取率計算各藥材成分用量，制成復方顆粒劑，可更有效地控制本制劑的內(nèi)在質(zhì)量。建立各有效成分含量測定方法，并應用HPLC方法，建立了復方抗艾顆粒劑的HPLC指紋圖譜分析方法，復方指標性成分進行定性定量控制，方法簡便、準確、重復性好，為其質(zhì)量控制提供了更全面的信息。鑒

3、于本復方由脂溶性成分和水溶性成份組成，水溶性有效成分以多糖為主，因此水溶性成分采用硫酸苯酚法，對其多糖成分進行定性定量控制。經(jīng)測定，水溶性成分中，多糖含量為25.7％。脂溶性成分用70％甲醇溶解，采用HPLC指紋圖譜分析方法對復方進行定性定量控制。經(jīng)過對三藥材組分紫外掃描，確證在315nm均有較大吸收，確定HPLC檢測波長為315nm。并經(jīng)過多次探索，確定洗脫系統(tǒng)為乙腈-0.1％三乙胺和25mmol/LKH<,2>PO<,4>水溶液(磷

4、酸調(diào)PH到3)。75min內(nèi)可使全部色譜峰流出，且大部分得到基線分離。梯度條件為0～20min乙腈體積分數(shù)由10增至25；25～35min乙腈體積分數(shù)由35增至45；60～75min乙腈體積分數(shù)由45增至75。檢測波長315nm；柱溫25℃；體積流量1.0 ml/min；進樣體積為20μl。根據(jù)峰面積計算指標性成分阿魏酸、蛇床子素、黃連素含量，阿魏酸含量均數(shù)為0.5795，RSD值為0.84％，蛇床子素含量均數(shù)為26.97，RSD值為0

5、.60％，黃連素含量均數(shù)為25.738，RSD值為0.29％。三種成分含量RSD值均小于5％，可見批內(nèi)檢測精密度較高，檢測方法重復性較好。生物活性研究部分進行體外抗艾滋病病毒活性研究、體外抑菌實驗研究、人體腫瘤細胞的細胞毒試驗以及體內(nèi)抗腫瘤活性研究等研究內(nèi)容，驗證了復方0326對HIV-1逆轉(zhuǎn)錄酶有一定的抑制作用。進一步藥理研究表明復方0326對真菌有一定的抑菌能力；抗腫瘤實驗結(jié)果顯示低劑量組具有明顯的抑制小鼠移植性腫瘤H22的作用。對