茯苓高產(chǎn)優(yōu)質(zhì)菌株的復(fù)壯技術(shù)研究.pdf

1、茯苓Wolfiporiacocos(Schw.)Ryv.＆Gilbn.是一種高等擔(dān)子菌，隸屬于層菌綱Hymcnomycetes，非褶菌目Aphyllophoralcs，多孔菌科Polyporaceae茯苓屬Wolfiporia，多年生的腐生真菌。其地下生長的菌核(sclerotium)是一種傳統(tǒng)的名貴藥食用真菌，具有較好的營養(yǎng)價(jià)值和藥用價(jià)值。茯苓野生資源極為有限，難以滿足市場的需求。茯苓的人工栽培雖早已實(shí)現(xiàn)，但在貴州尚未形成規(guī)?；脑耘?/p>

2、基地，菌種退化成為限制其發(fā)展的瓶頸之一。本課題通過一系列研究初步建立茯苓菌株的復(fù)壯體系，為實(shí)現(xiàn)茯苓的GPA基地建設(shè)和規(guī)?；a(chǎn)奠定基礎(chǔ)。 本研究對(duì)茯苓菌核進(jìn)行組織分離，對(duì)分離菌株進(jìn)行菌絲形態(tài)及熒光核染色顯微觀察。并分別采用了紫外光照射培養(yǎng)、菌絲尖端轉(zhuǎn)接分離、茯苓菌核分離復(fù)壯和單孢分離復(fù)壯，結(jié)果表明四種復(fù)壯方式均可達(dá)到一定的復(fù)壯效果，將菌絲尖端轉(zhuǎn)接分離與單孢分離復(fù)壯法結(jié)合是比較理想的復(fù)壯方式。 對(duì)培養(yǎng)基成分、光照條件、培養(yǎng)

3、溫度、傳代次數(shù)等對(duì)茯苓菌株在實(shí)驗(yàn)室條件下形成子實(shí)體的最適培養(yǎng)條件進(jìn)行了研究。結(jié)果表明，茯苓菌株子實(shí)體產(chǎn)生的最適培養(yǎng)條件為：在馬鈴薯瓊脂糖培養(yǎng)基(PDA)上，培養(yǎng)溫度(27±1)℃，光照強(qiáng)度60％(12000LX光照培養(yǎng)箱)，傳代次數(shù)5～7代，空氣相對(duì)濕度75％左右，培養(yǎng)時(shí)間18～30d，形成的子實(shí)體形態(tài)和數(shù)量各不相同，可形成蜂窩狀、山狀、迷宮狀、小菊花狀或針狀的子實(shí)體，單身或群生。 采用稀釋法分離茯苓單孢子，并進(jìn)行單孢子萌發(fā)實(shí)驗(yàn)

4、。結(jié)果表明在26℃條件下孢子萌發(fā)率最高，為45％。擔(dān)孢子萌發(fā)形成的菌絲較為濃密，呈白色短絨狀，氣生菌絲不明顯，生長緩慢。單孢萌發(fā)菌絲形成的菌落形態(tài)、菌絲生長速度和氣生菌絲濃密程度均有明顯差異，且遺傳穩(wěn)定性好。單孢配對(duì)實(shí)驗(yàn)表明，同一菌株擔(dān)孢子間配對(duì)都出現(xiàn)明顯拮抗線，但其中少數(shù)配對(duì)隨著培養(yǎng)時(shí)間增加在交接區(qū)形成扇形區(qū)域，拮抗線隨后消失。而不同菌株擔(dān)孢子間的配對(duì)則全部形成穩(wěn)定的柵欄型菌落，不能和諧生長。 栽培試驗(yàn)結(jié)果顯示，不同茯苓菌株野