AngII及ROS對高血壓合并胰島素抵抗大鼠影響的實驗研究.pdf

1、目的：(1)從血管緊張素Ⅱ（angiotensinⅡ，AngⅡ）/活性氧（reactive oxygen species，ROS)的角度解釋高血壓與胰島素抵抗之間的“紐帶”聯(lián)系機制;（2）為高血壓病的防治提供新的“靶點”和新思路。
　　方法：實驗分為5個組：（1）模型組：10只自發(fā)性高血壓大鼠（spontaneously hypertensive rats，SHR）、（2）坎地沙坦高劑量組（10只SHR，坎地沙坦4mg.kg-1.

2、day-1）、（3）坎地沙坦低劑量組（10只SHR，坎地沙坦0.4mg.kg-1.day-1）、（4）對照組（10只Wistar大鼠）、（5）Tempol組（10只SHR，Tempol20μg.kg-1.day-1）。除對照組飲用自來水外，其余各組均飲用10％果糖水，各組于實驗開始時灌胃給藥，每天1次，連續(xù)給藥8周，每4周測量一次血壓；實驗結(jié)束時，股動脈放血法處死動物，精密稱取左心室重；游標(biāo)卡尺測量左心室厚度和主動脈內(nèi)徑，主動脈管壁厚度

3、；用血糖儀測量大鼠血糖；采用放免法檢測每只大鼠的胰島素(insulin，INS)水平和AngⅡ；ELISA法檢測主動脈中ROS的含量；HE染色，觀察主動脈病理組織學(xué)改變；免疫組化法檢測主動脈中血管緊張素Ⅱ的1型受體（AngiotensinⅡtype1 receptor，AT1-R）、血管緊張素Ⅱ的2型受體（AngiotensinⅡ type2 receptor，AT2-R）表達；Western blot法檢測主動脈中磷酸化的蛋白激酶B（

4、protein kinaseB，Akt）的表達；用實時熒光定量PCR法檢測主動脈磷酸化Akt的mRNA的表達。
　　結(jié)果：（1）與對照組比較，模型組大鼠平均動脈壓、血糖和INS均升高(P<0.01或 P<0.05)；與模型組比較，坎地沙坦高劑量組、坎地沙坦低劑量組和Tempol組大鼠平均動脈壓、血糖和INS均降低(P<0.01或P<0.05)。（2）與對照組比較，模型組大鼠血漿AngⅡ增加(P<0.01)；與模型組比較，坎地沙坦高

5、劑量組，坎地沙坦低劑量組和Tempol組大鼠血漿AngⅡ沒有顯著變化，無統(tǒng)計學(xué)意義。（3）與對照組比較，模型組大鼠主動脈ROS含量升高(P<0.01)，經(jīng)過治療后，坎地沙坦高劑量組、坎地沙坦低劑量組和Tempol組大鼠與模型組大鼠比較，主動脈ROS含量均降低(P<0.01或P<0.05)。（4）與對照組比較，模型組大鼠胰島素抵抗指數(shù)明顯升高(P<0.01)；與模型組比較，坎地沙坦高劑量組和Tempol組大鼠胰島素抵抗指數(shù)降低(P<0.0

6、1)。（5）與對照組比較，模型組大鼠的左心室重和左心室厚度明顯增厚(P<0.01)；與模型組比較，坎地沙坦高劑量組，坎地沙坦低劑量組和Tempol組大鼠的左心室重和左心室厚度明顯降低(P<0.01)。與對照組比較，模型組大鼠主動脈內(nèi)徑和主動脈管壁厚度增大(P<0.05)；與模型組比較，坎地沙坦高劑量組，坎地沙坦低劑量組和Tempol組大鼠主動脈動脈內(nèi)徑和主動脈管壁厚度減小，其中坎地沙坦高劑量組差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，Tempo

7、l組大鼠主動脈動脈內(nèi)徑差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。（6）光鏡下各組的病理變化：模型組的大鼠有主動脈管壁輕度變性，主動脈管壁明顯增厚，內(nèi)皮細胞脫落；坎地沙坦高劑量組的大鼠少數(shù)有主動脈管壁輕度變性和主動脈管壁輕度增厚，內(nèi)膜、中膜及外膜層次結(jié)構(gòu)接近正常；坎地沙坦低劑量組的大鼠主動脈管壁輕度變性和主動脈管壁輕度增厚；主動脈內(nèi)皮細胞脫落等的變化；Tempol組的大鼠主動脈管壁輕度增厚，主動脈內(nèi)皮細胞脫落；對照組的大鼠主動脈組織結(jié)構(gòu)接近正常，

8、內(nèi)膜、中膜及外膜層次結(jié)構(gòu)清楚。（7）與對照組比較，模型組大鼠的AT1-R平均光密度值明顯增大（P<0.01）；與模型組比較，坎地沙坦高劑量組、坎地沙坦低劑量組和Tempol組大鼠的AT1-R平均光密度值均降低（P<0.01）；而各組大鼠的AT2-R平均光密度值變化不明顯，沒有統(tǒng)計學(xué)意義。（8）與對照組比較，模型組大鼠的Akt的蛋白表達降低(P<0.01)，與模型組比較，坎地沙坦高劑量組、坎地沙坦低劑量組和Tempol組大鼠 Akt的蛋白

9、均升高(P<0.05)。（9）與對照組比較，模型組大鼠磷酸化Akt的mRNA表達顯著下降(P<0.01)；與模型組比較，坎地沙坦高劑量組，坎地沙坦低劑量組和Tempol組大鼠磷酸化Akt的mRNA表達增加，其差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。
　　結(jié)論：（1）SHR大鼠給予果糖喂養(yǎng)，可成功建立高血壓合并胰島素抵抗的大鼠模型，該模型符合人類高血壓合并胰島素抵抗的病理特點；（2）AT1受體阻斷藥與 ROS抑制藥在降低血壓的同時，還能減