針刺對(duì)胰島素抵抗大鼠氧化應(yīng)激的影響.pdf

1、胰島素抵抗與高血壓、糖尿病、血脂異常、心腦血管疾病、肥胖等多種疾病密切相關(guān)，是導(dǎo)致這些疾病的“共同土壤”。近年來的研究表明:胰島素抵抗是心腦血管疾病中眾多代謝性異常的始動(dòng)原因和致病基礎(chǔ)，而血管內(nèi)皮功能障礙是動(dòng)脈粥樣硬化、高血壓、心腦血管疾病發(fā)生盼病理基礎(chǔ)和早期階段。胰島素抵抗和血管內(nèi)皮功能障礙二者之間存在相互影響、相互促進(jìn)的關(guān)系，形成惡性循環(huán)，在動(dòng)脈粥樣硬化的病理過程中扮演著重要的角色。大量的臨床研究報(bào)道證實(shí)，針刺在這些疾病的治療中具有

2、不可替代的優(yōu)勢，其作用機(jī)理與改善這些疾病中存在的胰島素抵抗現(xiàn)象密切相關(guān)。通過本課題組的前期研究，我們發(fā)現(xiàn)針刺能有效改善胰島素的敏感性，能從受體后水平調(diào)整和改善胰島素抵抗?fàn)顟B(tài)。本研究是以胰島素抵抗與血管內(nèi)皮功能障礙相互作用為基礎(chǔ)，設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)觀察針刺干預(yù)對(duì)胰島素抵抗模型大鼠的內(nèi)皮功能影響;以自發(fā)性胰島素抵抗模型-OLETF大鼠及同系正常大鼠-LETO大鼠為研究對(duì)象，用ELISA法、硝酸還原酶法、硫代巴比妥酸等等多種檢測方法，檢測空腹血糖(FP

3、G)、血清胰島素(FINS)、C肽、胰島素敏感指數(shù)(ISI)、一氧化氮(NO)、丙二醛(MDA)等血液指標(biāo)，觀察針刺干預(yù)對(duì)OLETF大鼠胰島素抵抗及內(nèi)皮功能障礙共同基礎(chǔ)的氧化應(yīng)激的影響，探討針刺對(duì)胰島素抵抗及血管內(nèi)皮功能障礙的作用機(jī)制。
　　目的：觀察針刺對(duì)自發(fā)性胰島素抵抗模型OLETF大鼠的氧化應(yīng)激的影響，探討針刺干預(yù)對(duì)改善胰島素抵抗及血管內(nèi)皮功能障礙的作用機(jī)理。
　　方法：實(shí)驗(yàn)選用雄性O(shè)LETF大鼠16只，正常雄性LET

4、O大鼠8只。將8只雄性LETO大鼠作為空白組，16只雄性O(shè)LETF大鼠按體重根據(jù)隨機(jī)數(shù)字表分為:模型組和針刺組，每組各8只?？瞻捉M和模型組不予針刺干預(yù)，針刺組則給予針刺干預(yù)。針刺穴位:腎俞、內(nèi)關(guān)、足三里和三陰交穴（均取雙側(cè)）。針刺方式選用疏密波的電針（疏波2Hz，密波50Hz，調(diào)制頻率10次/分），加電穴位選取雙側(cè)三陰交和足三里穴，電針刺激強(qiáng)度以大鼠肢體輕微抖動(dòng)為標(biāo)準(zhǔn)，針刺時(shí)間每日1次，每次持續(xù)20min，針刺干預(yù)持續(xù)4周。針刺前4周及

5、針刺4周療程中，每周稱重一次。在治療結(jié)束后，各組大鼠禁食不禁水12h。次日早晨取材。先用10％水合氯醛按體重將大鼠麻醉，采用眼眶靜脈竇采血，離心取上清，檢測針刺干預(yù)后FPG、FINS、C-P、NO、ET、SOD及MDA等指標(biāo)，用葡萄糖氧化酶法測定FPG;用ELISA法測定FINS、C-P、ET;用硝酸還原酶法測定NO;用WST-1微孔板法測定SOD;硫代巴比妥酸(TBA法)測定丙二醛(MDA);用1/(CFPG×JFINS)公式計(jì)算IS

6、I。取完血液樣品后，將大鼠四肢固定于鼠板上，沿腹中線開腹，從下往上分離出主動(dòng)脈，截取胸主動(dòng)脈，沿血管腔縱向剪開，置于4％多聚甲醛固定，HE染色。觀察針刺作用前后，OLETF大鼠主動(dòng)脈形態(tài)學(xué)改變情況。
　　結(jié)果：⑴在實(shí)驗(yàn)過程中，正常對(duì)照組大鼠體重增加，精神狀態(tài)良好，反應(yīng)靈敏，動(dòng)作自如，毛發(fā)有光澤。針刺前4周開始可見模型組及針刺組大鼠性情變溫順，嗜睡少動(dòng)，大鼠皮毛蓬亂、無光澤，大便量較正常組偏少，色灰，質(zhì)較軟，腹部肥胖。針刺4周后，可

7、見針刺組大鼠體重仍有增長，表現(xiàn)出精神萎靡，反應(yīng)遲鈍，動(dòng)作遲緩等較前有所好轉(zhuǎn)。⑵模型組的FPG、FINS、C-P相比空白組顯著升高（P＜0.01），ISI較空白組顯著降低(P＜0.01)。針刺組的C-P相比空白組顯著降低（P＜0.05），F(xiàn)PG、FINS和ISI與空白組相比無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。針刺組的FPG、FINS、C-P較模型組顯著降低（P＜0.01），ISI相比模型組顯著升高（P＜0.01）。⑶模型組的血清NO的水平相比空白組顯著降低(P

8、＜0.01)，模型組ET-1水平相比空白組顯著升高（P＜0.01）。針刺組的NO、ET-1水平相較空白組無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＞0.05）。針刺組的血清NO水平相比模型組顯著升高（P＜0.05），ET-1水平與模型組相比明顯降低(P＜0.01)。⑷模型組的血清SOD活力水平相比空白組明顯降低（P＜0.05），模型組MDA水平相比空白組顯著升高（P＜0.01）。針刺組的SOD活力水平、MDA相較空白組無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05)。針刺組的血清S

9、OD活力相比模型組顯著升高(P＜0.05)，MDA水平與模型組相比明顯降低（P＜0.01）。⑸各組大鼠主動(dòng)脈HE染色后于數(shù)碼成像顯微鏡下以200倍觀察，可見空白對(duì)照組大鼠的血管內(nèi)膜光滑完整、連續(xù)，無局部缺損或增厚，彈力纖維、血管平滑肌細(xì)胞排列整齊，未見浸潤的淋巴細(xì)胞等病理改變（見圖9）。而模型組大鼠的主動(dòng)脈內(nèi)皮層不連續(xù)，明顯失去內(nèi)膜的完整性，內(nèi)皮下層呈疏松或斷裂狀態(tài)，血管平滑肌細(xì)胞增生、肥大且排列紊亂(見圖10)。當(dāng)給予一定療程針刺干預(yù)