防治魚類細(xì)菌性疾病復(fù)合型蛋黃粉的研制.pdf

1、伴隨著漁業(yè)的迅猛發(fā)展，魚類細(xì)菌性疾病成為魚類最嚴(yán)重的一大類傳染性疾病，造成了巨大的危害和經(jīng)濟(jì)損失，防治策略主要有藥物防治、免疫防治和抗病育種。與畜禽傳染病的防治相比，我國魚病防治研究明顯落后。在理論上，魚的抗病育種具有一勞永逸的效果，但這是一個漫長的過程，也難以獲得對多種疾病具有抗性的品種。既無行之有效的水體環(huán)境控制策略和措施，也無效果顯著和易于推廣的疫苗，因此形成對化學(xué)藥物和抗菌素的過分依賴，它們的長期、大量和盲目使用，不僅導(dǎo)致病原體

2、耐藥性的產(chǎn)生、防治效果日益降低，而且已形成嚴(yán)重的水環(huán)境污染和水產(chǎn)品中有害物質(zhì)的大量殘留，嚴(yán)重威脅著人類健康。因此，只有大力開發(fā)和合理使用水產(chǎn)專用藥物，才能更有效地防治水產(chǎn)動物疾病，保護(hù)人類自身的健康和安全。雞卵黃抗體(IgY)作為一種免疫球蛋白，和血清抗體(IgG)的功能相似，且生產(chǎn)成本較低，易大量生產(chǎn)，不會帶來耐藥和藥物殘留等一系列問題，有望開發(fā)為一類可替代抗生素的高效生物防治制劑。 本研究對若干魚類主要病原菌及其致病性進(jìn)行驗

3、證后，對各抗原之間的交叉反應(yīng)性進(jìn)行了研究，還比較了IgY的四種提取方法以及酶聯(lián)免疫吸附試驗(EIASA)與微量凝集反應(yīng)(MA)兩種檢測方法。結(jié)果表明，各菌株之間幾乎不能交叉反應(yīng)，通過比較，IgY的最佳提取方法被確定，并決定采用微量凝集反應(yīng)作為檢測IgY的方法。在此基礎(chǔ)上用微量凝集法定期檢測由不同免疫程序獲得的IgY效價并制定效價曲線，結(jié)果顯示，有的抗原之間有免疫競爭或抑制現(xiàn)象，用三聯(lián)苗免疫產(chǎn)蛋雞四次比較好。 為了研究蛋黃粉的生物

4、學(xué)活性，用噴霧干燥法把多免后的高效價蛋黃液制成蛋黃粉，由蛋黃粉IgY的凝集效價以及抑菌試驗結(jié)果表明，噴霧干燥對IgY的效價和生物學(xué)活性基本不造成影響，凝集效價是24的含特異性抗體的卵黃水溶性組分(WSF)做625倍稀釋后仍產(chǎn)生50％的相應(yīng)抑菌效果，可見，蛋黃粉能有效地抑制相應(yīng)細(xì)菌的生長與繁殖；對噴霧干燥工藝進(jìn)行了非指定性細(xì)菌滅活試驗，結(jié)果顯示，該工藝能有效的滅活細(xì)菌：動物試驗方面，用制備的高價蛋黃粉定期適量地投喂鯽魚，確定了其安全性、可

5、口性，并能增強(qiáng)魚的抵抗力和產(chǎn)生一定特異性保護(hù)力，凝集效價是26的卵黃粉對1倍和2倍最小致死劑量的相應(yīng)致病菌可分別產(chǎn)生90％和75％的保護(hù)效果，證實了高效價卵黃粉防治魚類細(xì)菌性疾病的臨床應(yīng)用前景。 另外，從各嗜水氣單胞菌菌株提取了Aer毒素和ECPase，對他們及其生物學(xué)活性進(jìn)行了驗證。然后，設(shè)計不同的試驗組，并用溶血抑制、溶蛋白抑制試驗和微量凝集試驗來檢測并制備IgY效價曲線，結(jié)果顯示，不同菌株的Aer毒素和ECPase能分別交