重組HDL-抗乙肝病毒藥物復(fù)合物的制備及其肝靶向作用的研究.pdf

1、該研究分別采用了DS.50-MnCl<,2>法從人血漿提取獲得opoA-I,冷丙酮-MnCl<,2>法從FIV提取獲得apoA-I,冷丙酮-等電點(diǎn)法從基因工程畢赤酵母菌表達(dá)物提取獲得基因工程apoA-I.這些apoA-I經(jīng)Dot blotting和<'125>I放射法測(cè)定均具有與SMMC-7721肝細(xì)胞、HepG<,2>2.2.15肝細(xì)胞和大鼠肝臟細(xì)胞結(jié)合的生物活性.同時(shí)對(duì)阿昔洛韋進(jìn)行了前藥設(shè)計(jì)合成,利用阿昔洛韋和棕櫚酰氯合成阿昔洛韋的

2、前體藥物阿昔洛韋棕櫚酸酯,收率達(dá)68.0﹪.并通過(guò)紫外可見掃描光譜、紅外吸收光譜、質(zhì)譜及<'1>H核磁共振譜、<'13>C核磁共振譜、重水交換譜、BB-DEPT譜、<'1>H-<'1>H COSY譜、<'1>H-<'1>H譜、HSQC譜及HMBC譜等確證該化合物為設(shè)計(jì)前藥.應(yīng)用脫氧膽酸鈉法和超聲法可制備重組HDL-那西肽復(fù)合物和重組HDL-阿昔洛韋棕櫚酸酯復(fù)合物;其中脫氧膽酸鈉法可將復(fù)合物粒徑調(diào)控到約20nm.采用HepG<,2>2.2

3、.15肝細(xì)胞模型進(jìn)行抗乙肝病毒試驗(yàn).結(jié)果顯示人源apoA-I與基因工程apoA-I的重組HDL-那西肽復(fù)合物對(duì)HBsAg和HBeAg抑制率相當(dāng).以HBsAg抑制率50﹪為指標(biāo),二者的抗病毒能力都是那西肽脂質(zhì)體的4倍,是游離那西肽的20倍.重組HDL-阿昔洛韋棕櫚酸酯復(fù)合物的抗乙肝病毒試驗(yàn)結(jié)果顯示:人源apoA-I與基因工程apoA-I的重組HDL-阿昔洛韋棕櫚酸酯復(fù)合物對(duì)HBsAg和HBeAg抑制率也相當(dāng);以HBsAg抑制率20﹪為指標(biāo)

4、,二者的抗病毒能力都是阿昔洛韋棕櫚酸酯脂質(zhì)體的20倍,是游離阿昔洛韋棕櫚酸酯的20倍,是阿昔洛韋脂質(zhì)體的40倍,是游離阿昔洛韋的200倍.大鼠體內(nèi)靶向試驗(yàn)顯示,相比游離藥物在肝臟的含量17.5﹪和血漿的含量53.3﹪,人源apoA-I與基因工程apoA-I藥物復(fù)合物在肝臟的含量分別達(dá)到76.9﹪和71.2﹪,而血漿含量只有8.8﹪和10.2﹪.由此可見,人源apoA-I和基因工程apoA-I的重組HDL-抗乙肝病毒藥物復(fù)合物都具有肝靶向