轉(zhuǎn)WRKY基因菊花的抗蚜性育種利用.pdf

1、菊花（Chrysanthemum morifolium）原產(chǎn)我國(guó)，是我國(guó)十大傳統(tǒng)名花和世界四大切花之一，觀賞和經(jīng)濟(jì)價(jià)值高。然而，在菊花栽培過(guò)程中，蚜蟲(chóng)為害菊花嚴(yán)重，已成為菊花產(chǎn)業(yè)健康發(fā)展的瓶頸。因此，培育抗蚜性菊花新品種是解決該問(wèn)題的重要手段之一。本研究以廣泛用于栽培且觀賞性優(yōu)良的切花菊品種‘草莓菊’為母本和前期已獲得的攜帶逆境誘導(dǎo)轉(zhuǎn)錄因子Cm WRK Y53，Cm WRKY33切花菊品種‘神馬’轉(zhuǎn)化株系以及未轉(zhuǎn)化（野生型）菊花‘神馬’

2、為父本，進(jìn)行人工雜交，通過(guò)對(duì)3個(gè)雜交組合后代的目標(biāo)基因檢測(cè)、抗蚜性鑒定和部分觀賞性狀的遺傳變異分析，旨在探索CmWRKYs的有性傳遞情況及其對(duì)F1代抗蚜性和其他表型的影響，以期獲得觀賞性狀優(yōu)良且具有較強(qiáng)抗蚜性的切花菊新材料，為菊花抗蚜性育種提供種質(zhì)資源，同時(shí)為通過(guò)結(jié)合轉(zhuǎn)基因和常規(guī)雜交培育其他抗性菊花新品種提供參考依據(jù)。主要研究結(jié)果如下:
　　1.通過(guò)野生型、轉(zhuǎn)CmWRKY53和CmWRKY33的菊花‘神馬’與野生型菊花‘草莓菊’雜

3、交獲得30株雜交F1代植株，鑒定出2份攜帶Cm WRKY53和5份攜帶Cm WRKY33的F1代植株，初步證實(shí)外源WRKY基因是可以通過(guò)有性雜交的方式進(jìn)行傳遞的。
　　2.蚜蟲(chóng)接種鑒定結(jié)果表明，與對(duì)照相比，攜帶Cm WRKY33的菊花F1代株系C-1、C-3、C-6、C-9對(duì)蚜蟲(chóng)的增長(zhǎng)表現(xiàn)出一定的抑制作用，最高蚜口密度抑制率達(dá)30.59％;而攜帶CmWRKY53的菊花雜交后代B-5、B-7株系增加了蚜蟲(chóng)的敏感性，說(shuō)明外源基因的傳遞

4、影響雜交F1代雜交后代的抗蚜性，且雜交后代株系抗蚜性規(guī)律與攜帶相應(yīng)CmWRKYs的父本抗蚜性基本一致。
　　3.不同轉(zhuǎn)基因雜交后代均能正常生長(zhǎng)發(fā)育，所有雜交后代花部性狀基本呈偏母性遺傳，且差異不顯著，說(shuō)明轉(zhuǎn)基因菊花雜交后代植株并沒(méi)有因?yàn)橥庠椿虻霓D(zhuǎn)入使其在生長(zhǎng)發(fā)育上受到抑制，仍然能夠保持菊體的優(yōu)良性狀。與未轉(zhuǎn)基因雜交后代植株相比，以CmWRKY33轉(zhuǎn)化菊花為父本的雜交后代在株高、基部莖粗上增大的趨勢(shì)，表明在自然環(huán)境中以轉(zhuǎn)Cm WR