牙釉質(zhì)表面菌斑生物膜結(jié)構(gòu)的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、本課題檢測(cè)菌斑生物膜初期形成過(guò)程中的變性鏈球菌、遠(yuǎn)緣鏈球菌、血鏈球菌和死菌/活菌以及研究菌斑生物膜的立體結(jié)構(gòu)，進(jìn)一步認(rèn)識(shí)菌斑生物膜的發(fā)生發(fā)展過(guò)程，為齲病、牙周病的防治提供理論基礎(chǔ)和實(shí)驗(yàn)依據(jù)。 研究方法：從牙齒表面獲得完整的菌斑生物膜標(biāo)本，應(yīng)用激光共聚焦掃描顯微鏡和熒光原位雜交技術(shù)及死菌/活菌熒光染色技術(shù)相結(jié)合的方法，對(duì)天然菌斑生物膜形成初期的變形鏈球菌、遠(yuǎn)緣鏈球菌和血鏈球菌以及死菌/活菌進(jìn)行原位的、實(shí)時(shí)的動(dòng)態(tài)觀察，通過(guò)連續(xù)斷層掃

2、描及三維重建，研究變形鏈球菌、遠(yuǎn)緣鏈球菌和血鏈球菌以及死菌/活菌在天然菌斑生物膜中的空間分布。實(shí)驗(yàn)結(jié)果采用方差分析方法進(jìn)行統(tǒng)計(jì)處理，SPSS11.5統(tǒng)計(jì)軟件輔助完成；α設(shè)在0.05。 研究結(jié)果： 1.實(shí)驗(yàn)中各時(shí)間段的每個(gè)標(biāo)本均在牙釉質(zhì)磨片上形成菌斑生物膜。 2.菌斑生物膜呈三維立體結(jié)構(gòu)，形態(tài)多樣。細(xì)菌之間可見許多通道和空隙，貫穿整個(gè)生物膜。 3.菌斑生物膜變形鏈球菌、遠(yuǎn)緣鏈球菌和血鏈球菌在菌斑生物膜形成初

3、期的平均掃描厚度隨時(shí)間延長(zhǎng)而增加，1h時(shí)平均掃描厚度分別為20.43μm、11.5μm、14.76μm，到24h時(shí)平均厚度最大，分別為70.25μm、75.4μm、79.98μm。 4.菌斑生物膜形成初期，底層結(jié)構(gòu)稀疏，主要由死菌組成，約占70％～80％；中間層細(xì)菌密集，主要由活菌組成，約占40％～70％；頂層結(jié)構(gòu)同底層，活菌較少，約占20％～40％。中間層活菌百分比明顯高于內(nèi)層和外層(P＜0.05)，內(nèi)層與外層活菌百分比無(wú)差異