我國(guó)西南地區(qū)免疫接種后兒童乙肝隱匿性感染的研究.pdf

1、目的：調(diào)查我國(guó)西南地區(qū)父親和/或母親為乙肝表面抗原（hepatitis B surface antigen，HBsAg）陽(yáng)性的HBsAg陰性兒童乙型肝炎病毒（hepatitis B virus，HBV）疫苗接種后乙型肝炎病毒隱匿性感染（Occult Hepatitis B Virus Infection，OBI）的發(fā)生率，進(jìn)行基因變異分析并探討OBI發(fā)生的相關(guān)因素，為免疫接種后兒童OBI的流行病學(xué)研究奠定基礎(chǔ)。
　　方法：采集由父

2、親和/或母親為HBsAg陽(yáng)性的HBsAg陰性且接受過(guò)乙肝疫苗免疫的兒童血清標(biāo)本211份。血清學(xué)檢測(cè)由商品化化學(xué)發(fā)光法（chemiluminescent microparticle immunoassay，CMIA）試劑盒完成。排除年齡小于8m或乙肝疫苗全程免疫接種記錄不清的兒童，針對(duì)HBV基因組Surface區(qū)、Pre-S區(qū)、Core/pre-core區(qū)及X區(qū)利用巢式PCR（nested PCR）檢測(cè)血清中的HBV DNA，擴(kuò)增產(chǎn)物純化

3、后測(cè)序并進(jìn)行基因變異分析，2個(gè)或者2個(gè)以上區(qū)陽(yáng)性的樣本為 OBI陽(yáng)性。進(jìn)一步利用熒光定量 PCR（Real-time PCR）進(jìn)行HBV DNA定量，同時(shí)收集了患兒出生史、喂養(yǎng)史等臨床資料，分析OBI在該人群中的感染流行及相關(guān)因素。
　　結(jié)果：共有186名患兒最終納入本研究。我國(guó)西南地區(qū)父親和/或母親HBsAg陽(yáng)性的HBsAg陰性兒童乙肝疫苗免疫接種后OBI的發(fā)生率為4.3％（8/186）。在8名OBI的患兒中，6名患兒的父親為H

4、BV感染者，2名患兒的母親為HBV感染者。通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)株比對(duì)，基因進(jìn)化樹及NCBI分型工具分析發(fā)現(xiàn)8例患兒中2例為C基因型，其中1例血清型adrq-，另1例血清型未知。3例B基因型及3例B、C基因型共同感染均為血清型adw2。2例被發(fā)現(xiàn)存在抗原決定簇‘a(chǎn)’的逃逸突變且其中P77 HBV DNA水平與顯性感染相當(dāng)，因此被認(rèn)為是“假OBI”。另發(fā)現(xiàn)出位于主要親水區(qū)（major hydrophilic region，MHR）的多個(gè)突變。注射乙肝免

5、疫球蛋白（hepatitis B immune globulin，HBIG）不會(huì)降低OBI的發(fā)生率。母乳喂養(yǎng)及順產(chǎn)并非OBI的危險(xiǎn)因素，母乳喂養(yǎng)可能促進(jìn)保護(hù)性抗體的產(chǎn)生。OBI患兒血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶（alanine aminotransferase，ALT）及谷草轉(zhuǎn)氨酶（aspartate transaminase，AST）水平未見(jiàn)明顯異常。
　　結(jié)論：OBI存在于父親和/或母親HBsAg陽(yáng)性的乙肝疫苗免疫接種后兒童中。HBV S區(qū)的