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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:犬細(xì)小病毒病具有高度傳染性,臨床治療可降低患犬的死亡率,但高熱(41℃以上)病犬死亡率極高,甚至100%。本實(shí)驗(yàn)探索犬感染細(xì)小病毒后出現(xiàn)高熱原因,為臨床治療高熱型細(xì)小病毒病提供一定的實(shí)驗(yàn)和理論依據(jù)。
方法:采集臨床感染細(xì)小病毒(canine parvovirus,CPV)后高熱不退的病犬糞便,滅菌PBS液按1:5稀釋,離心后4℃?zhèn)溆?。選取10只未免疫健康本地犬,體重2~3 kg,日齡40~60 d,驅(qū)蟲,相同條件下正常飼
2、養(yǎng)1 w??诜ザ荆? ml/kg),連續(xù)攻毒3 d,每天觀察臨床癥狀,檢測(cè)體溫2次,待出現(xiàn)典型癥狀后,CPV檢測(cè)試紙檢測(cè),確定攻毒成功。血細(xì)胞分析儀測(cè)定確診前、后病犬血常規(guī)指標(biāo)參數(shù),1次/d,連續(xù)1 w。ELISA法測(cè)定確診前、后病犬血清中內(nèi)毒素和干擾素-ɑ的含量。實(shí)驗(yàn)結(jié)束后,采集瀕死或死亡動(dòng)物的心、肝、脾、肺、腎進(jìn)行細(xì)菌培養(yǎng)、分離純化、氧化酶實(shí)驗(yàn)和生化試驗(yàn)鑒定細(xì)菌菌種;中性福爾馬林溶液固定各器官,制作病理切片,HE染色,顯微鏡下觀察
3、各器官的病理學(xué)變化。
結(jié)果:實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下:
1.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物攻毒后臨床表現(xiàn):口服方式攻毒3 d后,實(shí)驗(yàn)動(dòng)物均出現(xiàn)精神沉郁、食欲廢絕、嘔吐、腹瀉、番茄色血便、眼窩下陷、結(jié)膜蒼白等典型臨床癥狀。CPV試紙檢測(cè)均呈強(qiáng)陽(yáng)性,說(shuō)明通過(guò)口服感染細(xì)小病毒復(fù)制病例的方法可行。
2.體溫變化:確診后,10只病犬中有3只出現(xiàn)高熱不退(41℃以上),有5只發(fā)熱但未達(dá)到41℃(39.0~41℃),高熱發(fā)生率為30%。在確定感染后的第2
4、~3 d,出現(xiàn)高熱的病犬確診后體溫?cái)?shù)據(jù)與確診前相比較出現(xiàn)顯著升高(P<0.05),第4~7 d體溫出現(xiàn)極顯著升高(P<0.01)。發(fā)熱但未達(dá)到41℃的病犬確診后體溫?cái)?shù)據(jù)與確診前相比較在第4~7 d出現(xiàn)極顯著升高(P<0.01)。兩者數(shù)據(jù)相比較,在第2~3 d體溫顯著升高(P<0.05),6~7 d體溫極顯著升高(P<0.01)。
3.血常規(guī)變化:體溫區(qū)間在39~41℃、41℃以上病犬血常規(guī)指標(biāo)分別與其確診前數(shù)據(jù)相比白細(xì)胞總數(shù)、
5、淋巴細(xì)胞總數(shù)在成功感染后3~7d均出現(xiàn)先升高再降低(P<0.05~P<0.01),紅細(xì)胞總數(shù)呈持續(xù)極顯著降低(P<0.01),淋巴細(xì)胞比率顯著或極顯著升高(P<0.05~P<0.01);而兩者相比,以上所述指標(biāo)變化差異不顯著。
4.內(nèi)毒素的變化:體溫在39~41℃區(qū)間的病犬確診前血清中內(nèi)毒素含量為0.17±0.02 Eu/L,確診后血清中內(nèi)毒素含量為0.29±0.02 Eu/L,比確診前顯著升高(P<0.05);體溫在41℃以
6、上的病犬確診前血清中內(nèi)毒素含量為0.16±0.06 Eu/L,確診后血清中內(nèi)毒素含量為0.39±0.07 Eu/L,比確診前極顯著升高(P<0.01)。41℃以上與體溫區(qū)間在39~41℃的病犬相比體內(nèi)內(nèi)毒素含量變化差異顯著(P<0.05)。
5.干擾素-ɑ的變化:體溫區(qū)間在39~41℃和41℃以上的病犬確診前血清中干擾素-ɑ含量(ng/ml)分別為99.38±6.26、117.01±51.77;確診后第7 d,體溫區(qū)間在39~
7、41℃的病犬血清中干擾素-ɑ含量為325.78±118.05,與確診前相比極顯著性升高(P<0.01)。41℃以上的病犬血清中干擾素-ɑ含量為358.75±101.82,與確診前相比極顯著性升高(P<0.01);與體溫區(qū)間在39~41℃病犬相關(guān)數(shù)據(jù)相比表達(dá)量有所升高但差異不明顯。
6.細(xì)菌培養(yǎng)及鑒定結(jié)果:體溫超過(guò)41℃以上病犬的肝臟培養(yǎng)皿中出現(xiàn)菌落;該菌落在麥康凱培養(yǎng)基中呈粉紅色,氧化酶實(shí)驗(yàn)證明該菌為革蘭氏陰性菌,生化試驗(yàn)鑒定
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