犬三種白內障模型的建立和氧化損傷性白內障發(fā)展進程中AQPO表達的研究.pdf

1、目的:通過探究犬三種白內障模型的建立并比較三種模型的優(yōu)缺點，選擇一種白內障模型作為續(xù)試驗，并檢測該模型白內障發(fā)展進程與AQP0表達之間的關系，探索AQP0對白內障形成的影響。
　　方法:(1)將60只平均年齡6月左右本地雜交犬，隨機分為6組，分別為氧化損傷性(Fenton)白內障模型組、糖尿病性(STZ)白內障模型組、硒性（亞硒酸鈉）白內障模型組和各模型對照組，每組10只。每日用裂隙燈觀察并拍照，根據(jù)LOCSⅢ分級標準記錄晶狀體的

2、結構變化并分級。(2)選取40只本地雜交犬隨機分為2組，分模型組和對照組，每組20只，根據(jù)LOCSⅢ分級標準對白內障的形成過程進行分級，并在模型組每級形成的時間節(jié)點上使用RT-PCR方法檢測晶狀體中AQP0的表達量。
　　結果:(1)硒性白內障模型，糖尿病性白內障模型和氧化損傷性白內障模型分級形成時間分別為C1(d):1±0.32、30±2.0和7±0.8。C2(d)分別為5±0.36、60±2.5和10±0.68。C3(d)分別

3、為11±0.48、150±6.25和15±1.0。C4(d)分別為0、180±6.5和24±1.54。C5(d)分別為0、240±12和48±1.52。硒性白內障造模時間最短，但毒性過大，死亡率高達100％，氧化損傷性白內障較糖尿病性白內障成模時間短。(2)硒性白內障C1形成時的犬只數(shù)量為10只，糖尿病性白內障為7只，氧化損傷性白內障模型為10只。C2形成時的犬只數(shù)量依次為10只、4只和10只。C3形成時依次為10只、3只和10只。C4

4、形成時依次為0只、3只和10只。C5形成時依次為0只、3只和10只。三種白內障模型對照組均為0只。氧化性白內障模型的成模穩(wěn)定性較糖尿病性和硒性好。(3)三種造模方式均具可操縱性，而氧化損傷性白內障較糖尿病性和硒性略難。(4)三種白內障模型裂隙燈的觀察:硒性白內障在注射亞硒酸鈉生理鹽水后1d后出現(xiàn)試驗犬雙眼皮質較多點狀混濁，5d后點狀混濁加深相連成散瞳后可見皮質及周圍橢圓形陰影，大量空泡，11d后陰影面積擴大形成片狀，空泡量增多，陰影區(qū)眼

5、底細節(jié)不清晰。糖尿病性白內障注射STZ后30d出現(xiàn)晶狀體少量的小囊泡，60d后小囊泡增多成群，150d后小囊泡連成片狀陰影，并由四周向赤道部伸展，陰影部眼底細節(jié)不清晰，180d后皮狀陰影加深，范圍擴大，陰影眼底細節(jié)不可見，240d后晶狀體皮質及核質完全呈灰白色混濁。氧化性白內障注射Fenton后第7d形成晶狀體皮質點狀分布的小白點陰影但可觀察眼底，注射后第10d晶狀體皮質點狀分布的小白點漸漸加深變大形成扇形分布的白色陰影，注射后第15d

6、晶狀體皮質扇形分布的白色陰影加深，范圍繼續(xù)擴大形成片狀，注射后24d片狀白色陰影擴展至晶狀體整個皮質，注射后第48d侵蝕形成成熟的皮質性白內障。(5)氧化損傷性白內障模型發(fā)展進程中AQP0表達量變化的數(shù)據(jù)處理采用相對定量的△△Ct法，根據(jù)各個基因的標準曲線，通過測試樣的CT值得到相對應的數(shù)據(jù)，以此比較Fenton注射的氧化性白內障形成后的7d、10d，15d、24d、30d、40d、48d的AQP0表達量變化。AQP0表達量在第7d為1