圈養(yǎng)斑嘴環(huán)企鵝的種群遺傳管理.pdf

1、學校代碼：1 0 2 2 5學 號：S 1 5 5 3 3學位論文圈養(yǎng)斑嘴環(huán)企鵝的種群遺傳管理指導教師姓名：申請學位級別：論文提交日期：授予學位單位：耿廣耀楊淑慧東北林業(yè)大學、碩士 學科專業(yè)： 特種經濟動物飼養(yǎng)2 0 1 5 年6 月 論文答辯日期： 2 0 1 5 年6 月東北林業(yè)大學 授予學位日期： 2 0 1 5 年6 月答辯委員會主席：論文評閱人：素夕厶櫛素大學摘要摘要斑嘴環(huán)企鵝( S p h e n i s c u sd e

2、m e r s u s ) 又名非洲企鵝，該種企鵝作為一種南半球特有觀賞鳥類于上世紀9 0 年代引入我國上海動物園，隨著動物觀賞市場需求變化，需要更多的斑嘴環(huán)企鵝來滿足廣大動物愛好者的觀賞需求。但是圈養(yǎng)在動物園的斑嘴環(huán)企鵝由于無野外種群和圈養(yǎng)種群模式小，一般采用“拉婚配”的配種方式，加之養(yǎng)殖時間長，譜系關系記錄不明確等原因，長期無計劃繁育或者被迫近親繁育，導致基因多樣性嚴重匱乏，種群發(fā)展受限。為解決以上問題，本文對動物園圈養(yǎng)斑嘴環(huán)企鵝群

3、體在線粒體D N A 和核D N A 層次進行了遺傳多樣性研究，以期確定我國圈養(yǎng)斑嘴環(huán)企鵝的親子關系、譜系關系，為斑嘴環(huán)企鵝的合理繁殖制定科學的方案。本課題主要以圈養(yǎng)在上海動物園的斑嘴環(huán)企鵝種群為研究對象，主要采用非傷害性取樣法，以4 6 只斑嘴環(huán)企鵝胸部廓羽為主要實驗樣本，利用試劑盒法提取D N A 。選擇適當?shù)囊镞M行P C R 擴增反應，擴增Z W 基因片段進行性別鑒定；利用M E G A 4 ．0 、C E R V U S3 ．

4、0 、P O P G E N EV e r s i o n 1 ．3 2 、S T R U C T U R E2 ．2 等分子生物學軟件對線粒體D N A 和核D N A 進行遺傳多樣性分析，構建種群系統(tǒng)進化樹，進行種群分析。結果如下：1 ．在3 9 個斑嘴環(huán)企鵝個體中發(fā)現(xiàn)1 5 個變異位點定義了1 0 個單倍型，不同單倍型的遺傳距離在0 ．0 0 2 ．0 ．0 1 9 之間，平均遺傳距離為0 ．0 1 2 。利用N J 法構建系統(tǒng)進

5、化樹，1 0 個單倍型分化為2 個大的進化分支。利用相同的方法構建上海和已知日本種群的線粒體控制區(qū)系統(tǒng)進化樹。與M u r a t a 和M u r a k a m i ( 2 0 1 4 ) 的研究結果相同，斑嘴環(huán)企鵝存在2 個明顯的世系( A 和B ) ，且上海種群的單倍型均屬于包含單倍型數(shù)目較多的A 世系。2 ．實驗用P N N 0 1 、P N N 0 3 、P N N 0 6 、P N N 0 9 、P N N 0 1 2 、

6、G 2 ．2 、B 3 ．2 、S h 2 C a 2 1 共8 個微衛(wèi)星位點在4 6 個樣品中共檢測到3 4 個等位基因，等位基因變化范圍在3 - 6 個。該套遺傳標記系統(tǒng)單個位點排除率在O ．5 6 ．0 ．8 7 之間，有5 個位點的D P > 0 ．8 ，其中P N N 0 9 位點的非父排除率最高為0 ．8 6 9 ，8 個位點的累積個體識別力達到9 9 ．9 9 ％，完全可以用于斑嘴環(huán)企鵝的個體識別，檢測沒有親緣關系的