應(yīng)用SSR標(biāo)記分析黃綠蜜環(huán)菌種群遺傳結(jié)構(gòu).pdf

1、黃綠蜜環(huán)菌(Armillaria luteo-virens),隸屬口蘑科(Tricholomataceae)蜜環(huán)菌屬[Armillaria( Fr.: Fr.) Staude],主要分布在我國(guó)的青海、西藏等地海拔3000-4500m的草原或高山草甸上,具有較高的食藥用價(jià)值和生態(tài)功能,是青藏高原珍貴真菌資源寶庫(kù)中典型代表種之一。
　　本研究利用SSR分子標(biāo)記方法對(duì)青海、西藏及四川的22個(gè)黃綠蜜環(huán)菌野生群體的種群遺傳結(jié)構(gòu)以及遺傳多樣性

2、進(jìn)行研究。主要研究結(jié)果如下:
　　1、應(yīng)用L16(45)正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)建立并優(yōu)化了黃綠蜜環(huán)菌SSR-PCR反應(yīng)體系,其最適反應(yīng)體系為15μL,其中包括:即在15μL反應(yīng)體系中包括:1×PCR Buffer,100ng模板DNA,dNTPs217μmol/L,primer0.5μmol/L,Taq DNA聚合酶0.75U,Mg2+1.3mmol/L。反應(yīng)程序?yàn)?94℃5 min;94℃30s,Ta℃30s,72℃1min,35個(gè)循環(huán);

3、72℃10min。
　　2、應(yīng)用上述優(yōu)化體系對(duì)近緣物種的SSR引物進(jìn)行篩選,共獲得8對(duì)具有較豐富的多態(tài)性的引物,并確定了每對(duì)引物 PCR擴(kuò)增的最適退火溫度,篩選出的8(占有效擴(kuò)增的57.1％)對(duì)核心SSR引物適用于黃綠蜜環(huán)菌群體遺傳學(xué)特征分析。
　　3、本研究利用7個(gè)微衛(wèi)星標(biāo)記對(duì)黃綠蜜環(huán)菌個(gè)體進(jìn)行遺傳多樣性和遺傳結(jié)構(gòu)分析,共檢測(cè)出38個(gè)等位基因,He在0.217-0.675之間,PIC為0.4226,7對(duì)微衛(wèi)星引物具有較高多