抑郁障礙患者多巴胺受體2多態(tài)性與改良電休克療效的相關(guān)研究.pdf

1、本文主要從以下幾個(gè)部分展開論述：
　　背景:
　　一.抑郁障礙
　　抑郁障礙(Depressive disorder)是一種最為常見的情緒性疾病。
　　有研究顯示,抑郁障礙患者中,有90％的人自身并沒有意識(shí)到患有抑郁障礙。抑郁障礙也被WHO稱為世界第四大疾病,由此趨勢(shì)發(fā)展,預(yù)測(cè)到2020年,抑郁障礙將超過腫瘤稱為僅次于心腦血管疾病的人類第二大疾患。
　　二.抑郁障礙與單胺及單胺受體假說
　　關(guān)于抑郁障

2、礙的確切病因,至今仍未完全清楚。隨著對(duì)抑郁障礙研究的深入,出現(xiàn)了神經(jīng)遞質(zhì)的受體學(xué)說(單胺受體假說)。近年來醫(yī)學(xué)研究結(jié)果顯示,多巴胺及多巴胺受體與抑郁障礙的發(fā)生有關(guān)。多巴胺通過受體的介導(dǎo),調(diào)節(jié)著與這些腦區(qū)相關(guān)的中樞神經(jīng)系統(tǒng)的多種功能及精神活動(dòng):感知、情感、行為和運(yùn)動(dòng)。多巴胺受體屬于G蛋白偶聯(lián)受體家族,有五個(gè)亞型,分別為D1-D5。其中Dl、D5受體稱為D1類受體,與Gs蛋白偶聯(lián)可激活腺苷酸環(huán)化酶,促進(jìn)細(xì)胞內(nèi)的cAMP生成,總體上起興奮性作

3、用;D2、D3、D4受體稱為D2類受體,與Gi蛋白偶聯(lián)可抑制腺苷酸環(huán)化酶,減少細(xì)胞內(nèi)的cAMP生成,總體上起抑制性作用。
　　三.抑郁障礙與MECT治療
　　抑郁障礙一旦診斷確立,即應(yīng)制訂合理的治療方案,目前抑郁障礙的治療方式主要包括藥物治療、心理治療、物理治療。藥物治療多需要在用藥后1-2周藥效濃度才達(dá)到平穩(wěn)起效,而在這段時(shí)間內(nèi)有不少患者因?yàn)樘幱诩膊〉募毙园l(fā)作期、抑郁障礙癥狀嚴(yán)重而導(dǎo)致自殘或自殺。改良電休克治療(Modif

4、ied electroconvulsive therapy,MECT)的出現(xiàn)剛好彌補(bǔ)了抗抑郁藥起效慢的不足。MECT的作用機(jī)制雖不明確,但MECT對(duì)重度抑郁障礙起效快、有效性好等特點(diǎn)明顯優(yōu)于抗抑郁藥治療。一些研究發(fā)現(xiàn)改良電休克治療后,患者腦脊液中5-羥色胺、去甲腎上腺素、多巴胺等神經(jīng)遞質(zhì)及尿液中腺苷酸環(huán)化酶增加,故認(rèn)為腦脊液中這些神經(jīng)遞質(zhì)的增加及腺苷酸環(huán)化酶的增加是電抽搐治療抗抑郁效果的基礎(chǔ)。
　　四.研究位點(diǎn)的選擇
　　鑒

5、于多巴胺受體的細(xì)胞內(nèi)信號(hào)傳導(dǎo)途徑與腺苷酸環(huán)化酶相關(guān),本研究初步圍繞DR受體篩選研究基因,DR受體有1-5五種,與抑郁障礙相關(guān)的、研究得較多的是D1受體,而D2、D3受體則通常與精神分裂癥一起研究。但通過擴(kuò)大查閱范圍,發(fā)現(xiàn)有外國學(xué)者報(bào)道DRD2受體基因C957T(rs6277)與MECT的治療效果有一定的關(guān)聯(lián),當(dāng)它與COMT基因Val158Met不同基因型協(xié)同時(shí),對(duì)MECT療效有統(tǒng)計(jì)學(xué)上的差異。于是本研究參考了外國的報(bào)道,結(jié)合中國人的特性

6、,對(duì)DRD2基因C957T此位點(diǎn)的多態(tài)性與抑郁障礙及MECT治療展開進(jìn)一步研究。
　　五.DRD2受體的生物學(xué)特性
　　DRD2基因位于1lq22-q23,長度65.8kb,有8個(gè)外顯子和7個(gè)內(nèi)含子,此內(nèi)含子把啟動(dòng)子區(qū)和蛋白編碼區(qū)分開。DRD2編碼415個(gè)氨基酸殘基,屬于G蛋白偶聯(lián)受體家族,其肽鏈七次跨越細(xì)胞膜,N端在胞外,C端在胞內(nèi)。DRD2基因可通過選擇性剪接形成長型(D2L)和短型(D2s)兩種異構(gòu)體,此兩種受體異構(gòu)體

7、對(duì)于G蛋白的親和力不同。D2L多分布于突觸后膜而D2s分布于突觸前膜。有研究發(fā)現(xiàn)這兩種異構(gòu)體在體內(nèi)對(duì)于調(diào)節(jié)D1受體方面起到相反作用,因而推測(cè)它們可相互拮抗。DRD2基因表達(dá)于尾殼核(CPu),伏隔核(Acb),視束(OT),腦皮層(Cx)和杏仁核。DRD2存在多種多態(tài)性,在多種神經(jīng)精神疾病,如精神分裂癥、抑郁障礙、藥物成癮等中發(fā)揮重要作用。DRD2屬于D2類受體,與Gi蛋白偶聯(lián)可抑制腺苷酸環(huán)化酶,減少細(xì)胞內(nèi)的cAMP生成,總體上起抑制性

8、作用。
　　目的:
　　分析DRD2基因C957T多態(tài)性與抑郁障礙的關(guān)聯(lián);
　　分析MECT治療抑郁障礙療效和DRD2基因C957T多態(tài)性的關(guān)系。
　　方法:
　　一.對(duì)象
　　(1)研究組100例,來源于在本院住院部及門診部接受MECT治療的抑郁障礙患者。入組標(biāo)準(zhǔn):1)年齡l8—65歲;2)符合《中國精神疾病分類與診斷標(biāo)準(zhǔn)》(CCMD-3)中抑郁發(fā)作的診斷標(biāo)準(zhǔn);3)無MECT禁忌證;4)MECT治療

9、前HAMD量表評(píng)分均≥17分;5)漢族。
　　(2)正常對(duì)照組100例,來源于本院職工、進(jìn)修醫(yī)護(hù)人員及實(shí)習(xí)學(xué)生。入組標(biāo)準(zhǔn):1)年齡18-65歲;2)無任何符合CCMD-3診斷標(biāo)準(zhǔn)的精神疾病;3)無精神疾病史及精神疾病家族史;4)漢族;5)HAMD量表評(píng)分均≤7分。
　　(3)全部研究對(duì)象的排除標(biāo)準(zhǔn):1)排除有嚴(yán)重軀體疾病,器質(zhì)性疾病者;2)妊娠、哺乳、藥物濫用者;3)排除雙相障礙、分裂情感障礙、惡劣心境和環(huán)性心境障礙。全部研

10、究對(duì)象均對(duì)本次研究知情同意。本研究主要采用分子生物學(xué)檢測(cè)、量表評(píng)定和MECT治療技術(shù)對(duì)MECT治療與DRD2基因多態(tài)性關(guān)系進(jìn)行探討。
　　二.量表
　?、貶AMD量表:HAMD量表是目前臨床用于評(píng)定抑郁癥最常用的量表,國內(nèi)外對(duì)其評(píng)價(jià)均具有良好的信度和效度。目前使用的版本有17項(xiàng)、21項(xiàng)、24項(xiàng)三種,主要采用17項(xiàng)版。
　　由兩名經(jīng)過一致性操作培訓(xùn)的精神科醫(yī)師對(duì)100位抑郁障礙患者及100位正常人進(jìn)行入組前的HAMD評(píng)分

11、。并且對(duì)抑郁障礙患者在MECT治療的第2、4、6、8次結(jié)束后進(jìn)行1次HAMD量表評(píng)定。
　?、贛ECT治療:使用美國產(chǎn)醒脈通電抽搐治療儀,根據(jù)患者的年齡設(shè)定治療劑量(即能量百分比,在ECG、EEG、血氧飽和度、呼吸等監(jiān)護(hù)下進(jìn)行MECT過程由治療師、麻醉師各一名共同完成,隔天1次上午進(jìn)行,總療程6-8次,并且分別在治療的第2、4、6、8次結(jié)束后個(gè)進(jìn)行1次HAMD量表評(píng)定。
　　三.實(shí)驗(yàn)室方法
　　⑴標(biāo)本采集:采集外周靜脈

12、血2 ml,加入0.2%EDTA抗凝劑進(jìn)行抗凝,-20℃冰庫保存待用。
　　⑵DNA的提取:待凍存的標(biāo)本常溫下自然解凍后,采用柱分離法提取DNA,參照試劑盒Blood DNA Kit,Genebase Bioscience說明書。
　?、荘CR技術(shù)擴(kuò)增DNA。
　　⑷使用ABI3730XL測(cè)序儀測(cè)出DNA序列。
　　四.統(tǒng)計(jì)分析
　　主要使用excel函數(shù)和SPSS軟件建立數(shù)據(jù)庫,對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。

13、>　　結(jié)果:
　　一 DRD2與抑郁障礙的關(guān)系研究
　　1)DRD2基因型判斷PCR擴(kuò)增產(chǎn)物總長為113bp。擴(kuò)增片段中存在957位堿基C→T替換,使用ABI3730XL全自動(dòng)DNA測(cè)序儀(Sanger法)測(cè)得有CC、CT兩種基因型(抑郁組及對(duì)照組均未能檢測(cè)出TT)。抑郁組中攜帶CC、CT基因型的頻率分別為94%、5%;對(duì)照組中攜帶CC、CT基因型的頻率分別為86%、13%。
　　2)抑郁組及對(duì)照組的DRD2基因分型及

14、其觀察值與期望值吻的合度(抑郁組 P>0.05;對(duì)照組P>0.05)。兩組基因型分布均符合Hardy-Weinberg定律,說明本研究所選取的研究組來自大的群體,無人口遷移等干擾群體特征因素,樣本具有群體代表性。
　　3)抑郁組與對(duì)照組DRD2基因多態(tài)性比較TT型及CT型合并計(jì)算,抑郁組CC基因的頻率高于正常對(duì)照組(χ2=3.911,P=0.048,P<0.05),其差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;兩組的等位基因頻率無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(χ2=3.72

15、5,P=0.054,P>0.05)。
　　4)C957T與抑郁障礙的相關(guān)性分析分析顯示:CC基因型的患病風(fēng)險(xiǎn)是CT基因型的2.809倍,患病風(fēng)險(xiǎn)增加(OR=2.809,95%CI:0.962-8.205;P<0.05),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。C等位基因的患病風(fēng)險(xiǎn)是T等位基因的2.712倍,患病風(fēng)險(xiǎn)增加(OR=2.712,95%CI:0.948-7.758;P>0.05)但無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　5)抑郁組中兩種基因型HAMD評(píng)分的比

16、較,用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn),得出總評(píng)分t=1.880,P>0.05。抑郁組中CC基因型與CT基因型的HAMD評(píng)分總分的差異及各因子分差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　二 DRD2與MECT療效研究
　　1)抑郁組(治療前)與對(duì)照組HAMD評(píng)分比較,有顯著性的差異,P<0.001。
　　2)抑郁組患者M(jìn)ECT治療第0次、2次、4次、6次、8次后,兩基因型的分值比較中,第0次(治療前)及第8次的差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;但第2次、4次、6次的分值

17、差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,3次的評(píng)分均是CC基因型比CT基因型高,提示CT基因型對(duì)MECT的反應(yīng)性較好。
　　3)MECT臨床療效評(píng)定,用excel的減法、除法計(jì)算得出,顯效率是67.7%,痊愈率是32.3%,數(shù)據(jù)表明MECT治療效果顯著。但由于CT數(shù)量較少,未能比較痊愈率與顯效率在基因水平之間的差別。
　　4)兩組基因型的第2、4、6、8次MECT治療后的HAMD減分率比較,顯示CT型的減分率比CC型高,且第2次和第4次的差異有統(tǒng)

18、計(jì)學(xué)意義(P<0.05),第6次和第8次差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)見表5。統(tǒng)計(jì)表明CT基因型對(duì)MECT初始療效的敏感性較高(起效快)。
　　結(jié)論:
　　1、DRD2基因rs6277多態(tài)性與抑郁障礙的發(fā)生可能有著相關(guān)性,相對(duì)CT基因型,CC基因型罹患抑郁障礙的風(fēng)險(xiǎn)增加。
　　2、MECT對(duì)抑郁障礙的療效顯著,DRD2-C957T基因多態(tài)性與MECT的治療效果(減分率)無相關(guān)性(P>0.05)。但攜帶CT基因型的患者