TRAP在評價棉花種質(zhì)資源多樣性中的應用研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、本研究應用目標區(qū)域擴增多態(tài)性(Target Region Amplification Polymorphism,TRAP)分子標記技術對來自國內(nèi)外的65份棉花種質(zhì)資源進行了遺傳多樣性分析。主要結(jié)果如下: 1.獲得適用于棉花的TRAP-PCR反應體系和反應程序為: 反應體系(15μl反應體系)為:48ng模板DNA;0.9 mmol/L Mg2+;dNTP1.26 mmol/L;固定引物0.5pmol/L;隨機引物0.1p

2、.mol/L和0.75UTaq酶。 反應程序為:94℃預變性4min;94℃變性45s,35℃退火45s,72℃延伸1 min;5個循環(huán);94℃變性1 min,52℃退火1min,72℃延伸1 min;35個循環(huán),72℃延伸7min;4℃保存。 2.對65份棉花材料進行TRAP標記分析的結(jié)果表明,被測材料間TRAP標記多態(tài)性較高,10個引物共擴增出252條帶,其中210條(占83.33%)具有多態(tài)性。每對引物平均可擴增出

3、21條多態(tài)性。在NTSYS-pc Version2.11統(tǒng)計分析軟件系統(tǒng)中,用UPMGA法進行聚類分析,遺傳相似性系數(shù)(GS)為0.8431時,65份種質(zhì)資源可以分為6類。TRAP標記可將其中的61份材料區(qū)分開。 3.基于TRAP標記數(shù)據(jù)的聚類結(jié)果與材料形態(tài)特征和材料地理分布有一定的關系??偟膩碚f,TRAP技術可以為棉花的系統(tǒng)演化和遺傳背景的研究提供幫助。 4.對于新海16與新海20上出現(xiàn)的特異性條帶進行回收克隆測序,4

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