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1、theAnalysisofGeneticDiversityforBretschneiderasinensisHemslBasedonSSRMarkersbyYANLijunAthesissubmittedinpartialfulfillmentoftheRequirementsforthedegreeofMasterofScienceSupervisorProfessorXUGangbiaoCemralSouthUniversityof
2、ForestryandTechnology498ShaoshanSouthRoad，TianxinDistrictChangshaHunan410004，RRCHINAJune，2015士高矗五捅斐伯樂樹(BretschneiderasinensisHemsl)隸屬于伯樂樹科(Bretschneideraceae)伯樂樹屬(Bretschneidera)，為單種科瀕危植物，主要零星分布在我國長江流域以南地區(qū)，已被列為國家一級重點(diǎn)保護(hù)植物
3、。作為古老的孑遺植物，伯樂樹對被子植物的系統(tǒng)發(fā)育、植物區(qū)系、古地理、古氣候等方面研究具有重要的科學(xué)價值。本研究采用SSR標(biāo)記對來自6個省(區(qū))的15個伯樂樹天然種群遺傳多樣性和遺傳結(jié)構(gòu)進(jìn)行分析，為其遺傳資源保護(hù)策略的制定提供種群遺傳學(xué)背景。主要研究結(jié)論如下：(1)伯樂樹SSR—PCR反應(yīng)體系利用單因素試驗(yàn)及正交試驗(yàn)對影響伯樂樹SSRPCR擴(kuò)增的主要因素進(jìn)行了優(yōu)化，篩選出伯樂樹SSRPCR的最佳反應(yīng)體系(2091)：M92125mmol／
4、L，dNTPO2mmol／L，TaqDNA聚合酶05U，引物039mol／L，DNA90ng。擴(kuò)增程序?yàn)椋?5℃預(yù)變性5min；95℃變性30s，退火溫度下退火45s，72℃延伸90s，35個循環(huán)；72℃延伸10min；4℃保存。(2)伯樂樹遺傳多樣性利用優(yōu)化的SSRPCR擴(kuò)增體系及篩選出多態(tài)性較高的4對引物對伯樂樹15個天然種群287株個體進(jìn)行遺傳多樣性評估。物種水平上，共檢測到17個等位基因，每個位點(diǎn)觀測等位基因數(shù)(4)為3～5，平
5、均為425；有效等位基因數(shù)(彳。)為11183～30770，平均為19829；Shannon信息指數(shù)(，)為02325～11664，平均為07683；觀測雜合度(風(fēng))為01115～05122，平均為03371；期望雜合度(鼠)為01060～O6762，平均為04061；Nei’S期望雜合度(日)為01058～O6750，平均為04054。種群水平上，各種群觀測等位基因數(shù)(么)為2～325，平均為25；有效等位基因數(shù)(彳。)為13441～
6、19617，平均為16188；Shannon信息指數(shù)(，)為03400～O7445，平均為O5413；觀測雜合度(風(fēng))為O1833～O5577，平均為O3521；期望雜合度(風(fēng))為01886～04253，平均為O3314；Nei’S期望雜合度(H)為01853～04168，平均為O3217。這表明伯樂樹在物種水平及種群水平均具有較高水平的遺傳多樣性。依據(jù)各種群遺傳參數(shù)綜合排序，黃桑(HS)種群遺傳多樣性最高，井岡山(JGS)種群遺傳多樣
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