針灸對CTX化療小鼠骨髓凋亡相關(guān)基因p53、bcl-2、bax蛋白表達(dá)的影響.pdf

1、目的 本課題采用昆明種小鼠腹腔環(huán)磷酰胺(CTX)注射造成白細(xì)胞減少模型，通過對第3天、第5天外周血白細(xì)胞計數(shù)、骨髓有核細(xì)胞相關(guān)凋亡基因bax、bcl-2、p53蛋白表達(dá)的檢測，從分子生物學(xué)的角度探討針灸提升白細(xì)胞數(shù)量、減輕骨髓抑制、保護(hù)造血干細(xì)胞的微觀機(jī)制。同時探討針刺和艾灸作用的差異。 方法 本課題通過腹腔注射環(huán)磷酰胺(CTX)，造成小鼠的白細(xì)胞減少模型。在此基礎(chǔ)上，將小鼠隨即分為針刺組、艾灸組、模型組、正常組

2、。除正常組外，其余3組腹腔注射環(huán)磷酰胺100mg/kg/d，連續(xù)3天，從造模后4小時給予針刺和艾灸治療，所選穴位為：“大椎”、“膈俞”、“腎俞”、“足三里”，分別在第3天、第5天治療后各處死一批小鼠，鏡檢小鼠外周血白細(xì)胞計數(shù)，免疫組化法檢測骨髓有核細(xì)胞凋亡相關(guān)基因bax、bcl-2、p53的蛋白表達(dá)。 結(jié)果 1.對骨髓有核細(xì)胞p53蛋白表達(dá)的影響：針刺組和艾灸組可以下調(diào)CTX化療小鼠骨髓有核細(xì)胞p53的蛋白表達(dá)，艾灸組優(yōu)

3、于針刺組，第5天優(yōu)于第3天，且艾灸組使p53蛋白表達(dá)陽性率接近正常組的水平。從而減輕了細(xì)胞凋亡，并可以使細(xì)胞周期盡快從停滯中恢復(fù)，開始增值、分裂。2.對骨髓有核細(xì)胞bax、bcl-2蛋白表達(dá)的影響：針刺組和艾灸組均可以上調(diào)凋亡抑制基因bcl-2的蛋白表達(dá)，下調(diào)促凋亡基因bax的蛋白表達(dá)，使Bax/Bcl-2比率降低，減輕CTX的骨髓損傷，抑制細(xì)胞凋亡，促進(jìn)細(xì)胞存活。且艾灸組優(yōu)于針刺組。 結(jié)論 本研究結(jié)果表明針刺和艾灸確實

4、可以減輕化療所致的骨髓抑制，保護(hù)造血干細(xì)胞，實現(xiàn)的途徑之一在于1.降低骨髓有核細(xì)胞p53蛋白表達(dá)的水平，減輕CTX使細(xì)胞周期阻滯，誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡的作用；2.上調(diào)bcl-2的蛋白表達(dá)、下調(diào)bax的蛋白表達(dá)，抑制細(xì)胞凋亡.3.p53蛋白陽性表達(dá)率遠(yuǎn)遠(yuǎn)大于bcl-2、bax的陽性表達(dá)率，由于p53蛋白的表達(dá)可以使細(xì)胞周期阻滯，使一部分細(xì)胞凋亡，另外一部分細(xì)胞通過修復(fù)繼續(xù)進(jìn)入細(xì)胞周期，開始分裂、增殖，所以針灸的作用機(jī)制可能還與DNA修復(fù)有更密切的