一種不同于entosis的細(xì)胞胞內(nèi)死亡.pdf

1、目的與意義： 細(xì)胞進(jìn)出運(yùn)動(dòng)(cell-in-cell)現(xiàn)象分為同種與異種兩大類型，我們擬通過(guò)比較兩大類細(xì)胞胞內(nèi)死亡來(lái)探討免疫細(xì)胞進(jìn)入腫瘤細(xì)胞以及腫瘤細(xì)胞進(jìn)入腫瘤細(xì)胞的形成機(jī)理和生物學(xué)意義，并可為研究免疫細(xì)胞與腫瘤細(xì)胞相互作用提供一個(gè)獨(dú)特的研究體系。 材料和方法： 1.采用吉姆薩染色、熒光標(biāo)記、Realtime細(xì)胞實(shí)時(shí)追蹤、共聚焦掃描、電鏡超微結(jié)構(gòu)分析等方法對(duì)細(xì)胞形態(tài)進(jìn)行觀察分析，并用不同的NK細(xì)胞與腫瘤細(xì)胞檢測(cè)了

2、細(xì)胞進(jìn)入發(fā)生的范圍。 2.利用免疫熒光、流式、熒光底物等方法對(duì)細(xì)胞的特異性蛋白進(jìn)行標(biāo)記檢測(cè)，比較與吞噬運(yùn)動(dòng)、細(xì)胞凋亡、entosis現(xiàn)象的異同點(diǎn)。 3.利用siRNA技術(shù)、免疫熒光、藥物處理等方法，檢測(cè)參與細(xì)胞進(jìn)出運(yùn)動(dòng)的關(guān)鍵蛋白及信號(hào)通路。 結(jié)果： 1.記錄到NK細(xì)胞進(jìn)入腫瘤細(xì)胞的三種命運(yùn)，以及NK細(xì)胞周圍的空泡結(jié)構(gòu)。NK細(xì)胞伸入腫瘤細(xì)胞現(xiàn)象發(fā)生廣泛。 2.NK細(xì)胞伸入腫瘤細(xì)胞與吞噬運(yùn)動(dòng)的識(shí)別信號(hào)

3、無(wú)直接關(guān)系，NK細(xì)胞在腫瘤細(xì)胞內(nèi)死亡后的caspase處于活化狀態(tài)，TUNEL(+)。 3.腫瘤細(xì)胞表面的E-cadherine及腫瘤細(xì)胞內(nèi)ezrin的表達(dá)會(huì)影響NK進(jìn)入腫瘤細(xì)胞的比率，腫瘤細(xì)胞內(nèi)PKA途徑也會(huì)影響NK細(xì)胞的伸入率。 結(jié)論： NK細(xì)胞進(jìn)入腫瘤細(xì)胞后大部分發(fā)生死亡，可能是腫瘤細(xì)胞反殺免疫細(xì)胞的一種模式。伸入運(yùn)動(dòng)發(fā)生廣泛，不存在MHC限制性，在干細(xì)胞中的伸入率很高，因此我們認(rèn)為伸入運(yùn)動(dòng)具有普遍性和保