Survivin基因沉默誘導(dǎo)人腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞凋亡的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、第一部分人腦膠質(zhì)瘤中重要凋亡相關(guān)蛋白表達(dá)研究　　目的:研究人腦膠質(zhì)瘤組織中重要凋亡相關(guān)蛋白Survivin、p53、Caspase-3、Caspase-7的表達(dá)，探討其與細(xì)胞凋亡、增殖的關(guān)系。 方法:采用免疫組化SP法檢測(cè)了Survivin、p53、Caspase-3、Caspase-7在48例人腦膠質(zhì)瘤和8例正常腦組織中的表達(dá)情況。TUNEL技術(shù)用于檢測(cè)組織中細(xì)胞凋亡現(xiàn)象，Ki-67增殖指數(shù)的檢測(cè)則采用SABC法。

2、第二部分特異性siRNA對(duì)人腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞Survivin基因表達(dá)抑制作用　　目的:Survivin屬IAP基因家族成員，表達(dá)于多種腫瘤組織中，能使細(xì)胞逃避凋亡，并促進(jìn)細(xì)胞的異常有絲分裂。本研究旨在探討siRNA敲除Survivin基因的可行性，并觀察其對(duì)人腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞凋亡的影響。 方法:采用人工合成的小干擾RNA(siRNA)體外阻抑膠質(zhì)瘤細(xì)胞的Survivin基因，即時(shí)定量PCR方法檢測(cè)SurvivinmRNA表達(dá)水平，流式

3、細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞凋亡率。 第三部分Survivin基因沉默對(duì)人腦膠質(zhì)瘤T98細(xì)胞電離輻射耐受性影響　　目的探討Survivin基因沉默后人腦膠質(zhì)瘤T98細(xì)胞對(duì)電離輻射耐受性影響。 方法利用人工合成的特異性siRNA抑制T98細(xì)胞Survivin基因的表達(dá)；直線加速器對(duì)實(shí)驗(yàn)中各組細(xì)胞進(jìn)行輻照，劑量為10Gy；四甲基偶氮唑藍(lán)(MTT)法檢測(cè)細(xì)胞增殖活性。 第四部分Survivin特異性siRNA聯(lián)合格列衛(wèi)對(duì)膠質(zhì)瘤T9