MicroRNA-195對人腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞增殖和凋亡的影響.pdf

1、目的：探討microRNA-195（miR-195）對人腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞U251增殖和凋亡方面的作用，并探討其產(chǎn)生影響可能的作用機(jī)制。
　　方法：通過脂質(zhì)體將miR-195mimics轉(zhuǎn)染至人腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞U251，Real-timePCR檢測轉(zhuǎn)染前后miR-195表達(dá)水平；用CCK-8法計算細(xì)胞生長抑制率和平板克隆形成實驗評價細(xì)胞的增殖能力；流式細(xì)胞儀分析細(xì)胞凋亡和周期；Hoechst33342和PI雙染法檢測原位細(xì)胞凋亡壞死；Cas

2、pase活性檢測試劑盒檢測Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9的活性；利用生物信息學(xué)技術(shù)預(yù)測miR-195的靶基因，免疫細(xì)胞化學(xué)檢測Bcl-2的蛋白水平。應(yīng)用SPSS13.0統(tǒng)計軟件處理數(shù)據(jù)，定量資料采用xs±描述，多組間數(shù)據(jù)比較采用單因素方差分析（one-wayANOVA），組間兩兩比較采用LSD-t檢驗，P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。
　　結(jié)果：Real-timePCR測得轉(zhuǎn)染后miR-195表達(dá)水平提

3、高6倍左右；細(xì)胞生長抑制率和平板克隆形成結(jié)果分別顯示過表達(dá)miR-195可以抑制U251細(xì)胞生長和克隆形成能力；流式細(xì)胞儀測細(xì)胞凋亡和Hoechst33342&PI雙染法結(jié)果示miR-195組U251細(xì)胞凋亡和壞死比例明顯增高；流式細(xì)胞儀測細(xì)胞周期發(fā)現(xiàn)miR-195能夠阻滯U251細(xì)胞在G0/G1期；轉(zhuǎn)染miR-195后U251細(xì)胞中Caspase-3和Caspase-9被激活，而Caspase-8未被激活；TargetScan預(yù)測發(fā)現(xiàn)