TGF-β1 Snail E-cadher in及N-cadher in在胃癌中的表達(dá)及意義.pdf

1、目的：觀察胃癌組織中TGF-β1、Snail、E-cadherin及N-cadherin蛋白的表達(dá)及其與胃癌臨床病理特征的關(guān)系；觀察人重組TGF-β1對人胃癌細(xì)胞株BGC-823細(xì)胞中Snail、E-cadherin及N-cadherin蛋白表達(dá)的影響，初步探討它們在胃癌發(fā)展中的作用及其臨床應(yīng)用價(jià)值。 方法：第一部分：采用免疫組織化學(xué)方法檢測96例胃癌組織及80例癌旁組織中TGF-β1、Snail、E-cadherin及N-ca

2、dherin的表達(dá)，并與臨床病理資料作對照分析；第二部分：選取人低分化胃腺癌細(xì)胞株BGC-823細(xì)胞為研究對象，在外源性TGF-β1作用及空白對照的情況下，采用免疫細(xì)胞化學(xué)法、免疫熒光法、流式細(xì)胞術(shù)分別檢測Snail、E-cadherin及N-cadherin蛋白的表達(dá)變化，利用MTT比色試驗(yàn)來檢測細(xì)胞的增殖變化，選用劃痕試驗(yàn)及Transwell培養(yǎng)小室來檢測TGF-β1對細(xì)胞的遷移及侵襲能力的影響，并利用小室聯(lián)合培養(yǎng)了人胃癌細(xì)胞和人臍

3、靜脈內(nèi)皮細(xì)胞，間接反映TGF-β1對內(nèi)皮細(xì)胞黏附癌細(xì)胞能力的改變。 結(jié)果：第一部分：胃癌組織及癌旁組織TGF-β1、Snail、E-cadherin及N-cadherin陽性表達(dá)率分別為63.5％、83.3％、37.5％、44.8％和28.8％、41.3％、100％、11.3％。四種蛋白在胃癌組織及癌旁組織的表達(dá)差異均有顯著性(P<0.05)。 E-cadherin表達(dá)的降低及TGF-β1、Snail、N-cadherin表達(dá)的

4、升高與胃癌不同分化程度、組織學(xué)類型、浸潤深度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移有關(guān)(P<0.05)。N-cadherin與TGF-β1蛋白的表達(dá)呈正相關(guān)，并且與E-cadherin的表達(dá)呈負(fù)相關(guān)。E-cadherin與TGF-βl、Snail的表達(dá)均呈負(fù)相關(guān)(P<0.05)。第二部分：[1]在外源性TGF-βl作用的情況下，胃癌細(xì)胞均不同程度地表達(dá)Snail、E-cadherin及N-cadherin，其中E-cadherin和N-cadherin

5、的表達(dá)呈相反的趨勢：TGF-β1對E-eadherin的表達(dá)有抑制作用，而對N-cadherin的表達(dá)則有促進(jìn)作用；[2]經(jīng)過18h的作用，低濃度(1、5和10ng/ml)的TGF-β1促進(jìn)胃癌細(xì)胞的增殖，高濃度(20和50ng/ml)的TGF-β1則抑制胃癌細(xì)胞的增殖，分析發(fā)現(xiàn)呈劑量依賴性；并選取不同時(shí)間段(18h、42h、66h)檢測細(xì)胞生長曲線，分析發(fā)現(xiàn)不呈時(shí)間依賴性；[3]選取不同濃度的TGF-β1(1、10和20ng/mβ)，

6、發(fā)現(xiàn)10ng/ml的TGF-β1明顯促進(jìn)胃癌細(xì)胞遷移及侵襲(P<0.05)；選取濃度為10ng/ml的TGF-β1與空自對照組比較，也發(fā)現(xiàn)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞在此濃度下呈現(xiàn)明顯的向胃癌細(xì)胞遷移的趨勢(P<0.05)。 結(jié)論：TGF-β1、Snail蛋白的高表達(dá)、E-cadherin蛋白的低表達(dá)與N-cadherin的反常表達(dá)與胃癌的浸潤和轉(zhuǎn)移有密切的關(guān)系，人工培養(yǎng)的胃癌細(xì)胞的鈣黏蛋白表型可以從E-cadherin向(N-cadhe