TGF-β1和E-Cad在胚胎停育絨毛組織中的表達變化及臨床意義.pdf

1、背景與目的：
　　胚胎停止發(fā)育（early embryonic death）是指孕早期因某種因素或多種因素共同作用引起胚胎發(fā)育停止導致胚胎死亡,最終導致流產(chǎn),是流產(chǎn)前的病理過程。彩超檢查提示妊娠囊內胎芽或胎兒形態(tài)不整，無胎心搏動，或表現(xiàn)為枯萎卵。胚胎停育是一種常見的早期病理妊娠，其結局常為稽留流產(chǎn)或不全流產(chǎn)，危害育齡期婦女生殖健康，妊娠年齡推遲，給患者及家屬帶來了一定的經(jīng)濟負擔和心理負擔，再次妊娠胚胎停育的風險增加可能導致惡性循環(huán)

2、。胚胎停育在育齡期婦女妊娠中發(fā)病率為15-30％，且近年來有增加趨勢。目前認為胚胎停育的常見致病因素為染色體、感染、有毒物質接觸、年齡、內分泌、免疫等，但據(jù)國內外文獻報道約40-50%的胚胎停育原因不明。近年來研究發(fā)現(xiàn)胚胎在著床過程中絨毛滋養(yǎng)細胞對子宮內膜的侵襲深度及絨毛內血管的生成與妊娠早期胚胎早期停育、流產(chǎn)等病理妊娠的發(fā)生密切相關。
　　早期妊娠過程中滋養(yǎng)細胞對子宮肌層的適度浸潤是妊娠成功的關鍵，而轉化生長因子-β1（Tran

3、sforming growth factor-β1，TGF-β1）和E-鈣黏蛋白（E-cadherin，E-cad）在其過程中發(fā)揮重要作用?，F(xiàn)有文獻認為，TGF-β1可能通過調節(jié)妊娠期體內Th1/Th2型細胞因子的平衡、下調TIMP-1和MMP9產(chǎn)生抑制滋養(yǎng)細胞過度侵襲以及免疫抑制作用來維持母胎界面的免疫耐受狀態(tài)參與胚胎停止發(fā)育；E-cad是一種廣泛表達于上皮細胞膜表面鈣依賴的粘附分子，介導的粘附系統(tǒng)是已被公認的“侵潤抑制系統(tǒng)”，其在絨

4、毛各部位的表達逐漸下降，有利于滋養(yǎng)細胞的侵入子宮肌層完成著床。國內外文獻表明，在體內TGF-β1可以利用smad依賴和非smad依賴的信號通道使E-Cad的表達下降，從而破壞細胞間的粘附屏障。綜上所述，有理由設想，在胚胎絨毛組織中，某種原因導致的TGF的下調，進而TGF通過各種途徑上調了 E-cad，二者共同參與了胚胎停育的發(fā)生發(fā)展。本課題擬采用實時熒光定量逆轉錄聚合酶鏈式反應（RT-PCR）及免疫組化，檢測妊娠早期胚胎停育絨毛組織和妊

5、娠早期正常胚胎絨毛組織中TGF-β1和E-Cad表達情況，分析兩組之間TGF-β1和E-Cad表達的差異，探討TGF-β1和E-Cad在早期妊娠胚胎停止發(fā)育機制中的作用，為孕早期胚胎停育的發(fā)病機制研究提供一種新的思路和一定的理論依據(jù)。
　　方法：
　　對在我院隨機收集的30例妊娠早期胚胎停育絨毛組織和30例妊娠早期正常胚胎絨毛組織。
　　1.采用 Real-time PCR技術，檢測兩組絨毛組織中TGF-β1mRNA和

6、E-Cad mRNA表達情況。
　　2.采用免疫組織化學技術（免疫過氧化物酶法）檢測兩組絨毛組織中TGF-β1和E-Cad蛋白的細胞定位及表達情況。
　　3.采用 SPSS17.0統(tǒng)計軟件對實驗數(shù)據(jù)進行分析，定量資料采用 t檢驗，定性資料的比較采用卡方檢驗，兩定量資料的相關性分析采用pearson檢驗，以α=0.05為檢驗水準。
　　結果
　　1.30例妊娠早期胚胎停育組和30例妊娠早期正常胚胎組患者的年齡、孕次

7、、孕囊大小、停經(jīng)天數(shù)（P＞0.05）；
　　2.TGF-β1mRNA在兩組絨毛組織中均有表達，胚胎停育組TGF-β1mRNA表達量顯著低于正常對照組（t=2.8592, p＜0.05）；
　　3.E-CadmRNA在兩組絨毛組織中均有表達，胚胎停育組E-CadmRNA表達量明顯高于正常對照組（t=6.024, p＜0.05）；
　　4.TGF-β1蛋白在兩組絨毛組織中滋養(yǎng)層細胞均有不同程度的陽性表達，主要定位于滋養(yǎng)細胞

8、細胞質，TGF-β1蛋白在胚胎停育組中的陽性表達率（33.3%）顯著低于正常對照組(70%)（χ2=8.076,P＜0.05）；
　　5.E-Cad在兩組絨毛組織中滋養(yǎng)層細胞均有不同程度的陽性表達，主要定位于滋養(yǎng)細胞細胞膜，E-Cad蛋白在胚胎停育組中的陽性表達率（50%）顯著高于正常對照組(30%)（χ2=5.934,P＜0.05）；
　　6.在正常對照組絨毛組織中均有TGF-β1蛋白和E-Cad蛋白表達，正常早孕期絨毛組

9、織中 TGF-β1蛋白和 E-Cad蛋白表達呈負相關，關聯(lián)系數(shù) r=0.215，（χ2=8.231，P＜0.05）；
　　7.在胚胎停育絨毛組織中均有TGF-β1蛋白和E-Cad蛋白表達，早孕期胚胎停育絨毛組織中 TGF-β1蛋白和 E-Cad蛋白二者表達呈負相關，關聯(lián)系數(shù) r=0.470，（χ2=8.523，P＜0.05）。
　　結論
　　1.胚胎停育患者絨毛組織中TGF-β1的表達量下降，E-Cad的表達量升高，二