小麥抗葉銹病近等基因系TcLr35的RGA分析.pdf

1、由小麥葉銹菌引起的小麥葉銹病是影響世界小麥穩(wěn)產高產的重要病害之一，也是影響我國小麥生產的重要因素。持續(xù)篩選抗病基因和培育抗病品種是防治小麥葉銹病發(fā)生的主要手段。小麥抗葉銹病基因Lr35最初來源于擬斯卑爾脫山羊草，通過與Triticina.monococcum的二倍體回交將其轉移到小麥品種馬奎斯中。該基因位于2B染色體上，與Sr39緊密連鎖。其抗性在二葉期開始表達，六葉期完全表達，是一個應用潛力很大的由主效基因控制的抗病基因。 抗

2、病基因類似序列(RGAs)技術是利用抗病基因具有保守結構域的特性，通過人工合成引物對基因組DNA進行定點擴增，在全基因組水平上檢測DNA變異。本試驗以含小麥抗葉銹病基因Lr35的近等基因系材料TcLr35和感病親本Thatcher以及其它小麥抗葉銹病近等基因系材料進行RGA分析。主要結果如下: 根據(jù)已克隆的植物抗病基因普遍具有的NBS和LRR結構域設計49條RGA引物，組成260對引物組合，從近等基因系TcLr35中擴增獲得4條

3、特異性片段。其中引物對Pto-kin1IN/XL,RR-INV1從近等基因系TcLr35中擴增獲得一條747bp的穩(wěn)定特異性片段。以本實驗室保存的49個小麥抗葉銹病近等基因系材料進行擴增，發(fā)現(xiàn)此條帶僅在TcLr35中存在，而在其他48個小麥抗葉銹病近等基因系材料及感病親本Thatcher中均未出現(xiàn)，說明該片段特異性很強。對該特異性片段進行序列測定與分析，經BLAST比較，表明該片段與許多已克隆出來的小麥基因序列相似:與Triticumm

4、onococcum DV92的BAC克隆231A16有84％的同源性，與Triticum urartu clone BAC210J24有96％同源性；與Triticum turgidum subsp.durum clone BAC 221H19有90％同源性；與Triticum urartu clone BAC 41C8有89％同源性；與Triticum urartu clone BAC292N12有88％同源性等。對該特異性片段進行蛋