小麥抗葉銹近等基因系TcLr38的cDNA-AFLP分析.pdf

1、由小麥葉銹菌(Puccinia triticina)引起的小麥葉銹病是影響世界小麥穩(wěn)產高產的重要病害之一，也是影響我國小麥生產的重要因素。持續(xù)篩選抗病基因和培育抗病品種是防治小麥葉銹病發(fā)生的主要手段。小麥抗葉銹基因Lr38發(fā)現(xiàn)位于中間偃麥草(Agropyron intermedium)第七組的一條染色體上，并被標定在小麥的2AL染色體上。小麥抗葉銹基因Lr38是在苗期即開始表達，具有很強的抗病性，國內至今尚未發(fā)現(xiàn)對Lr38表現(xiàn)高毒力的菌

2、株存在，是一個應用潛力很大的由主效基因控制的抗病基因。 本研究應用小麥葉銹菌菌株THTS為材料，該菌株對含有小麥抗葉銹基因Lr38的近等基因系材料TcLr38表現(xiàn)型為(0；)，而對感病對照Thatcher表現(xiàn)型為(4)。分別接菌于小麥抗葉銹近等基因系TcLr38和感病對照Thatcher，應用cNA-AFLP技術從mRNA表達方面研究TcLr38與小麥葉銹菌互作時的基因表達的差異，結果如下： 1．共選用224對引物組合對

3、TcLr38差異表達的基因進行了分析，共觀測到約4300條條帶，平均每一對選擇性引物可以獲得19條條帶。得到了68對能夠在小麥近等基因系TcLr38和感病對照Thatcher之間擴增出差異條帶的多態(tài)性引物，多態(tài)性引物檢出率為30.3％。 2．得到了8種不同的差異表達的多態(tài)性條帶類型，其中2種為TcLr38與葉銹菌互作時的特異性表達的條帶類型。通過對68對多態(tài)性引物進行篩選，一共得到8對引物能夠擴增出特異性條帶。所得的8對AFLP

4、引物分別是P-CG/M-CTC、P-AC/M-CAC、P-CA/M-CGA、P-AA/M-CTG、P-GC/M-CAC、P-AG/M-CAA、P-AG/M-GGT。 3．得到了8條小麥抗葉銹近等基因系TcLr38的特異性表達片段，對其進行序列測定與分析，經Blastn比較，共有7個在數(shù)據(jù)庫中找到同源序列，且與一些植物中的EST序列具有較高的同源性，同源性為83％-100％；經Blastx比較，6個序列所推導的蛋白質序列在GenB

5、ank中找到其所對應的同源序列，同源性為59％-92％，有5個序列為已知功能的基因，其中BRASSINOSTEROID INSENSITIVE1-associated receptor kinase 1 precursor、GTPase-activating protein、receptor-like kinase三個基因屬于信號轉導相關基因，Receptor-like kinase可能與抗病或防御相關。而序列38-3在Blastn和B