移蟲(chóng)日齡對(duì)蜂王生長(zhǎng)發(fā)育及蜂王卵巢蛋白質(zhì)組學(xué)的影響.pdf

1、選擇合適蟲(chóng)齡的幼蟲(chóng)是蜂王人工培育的關(guān)鍵。眾多研究者關(guān)注于針對(duì)3日齡前后幼蟲(chóng)差異導(dǎo)致的級(jí)型分化及其分子機(jī)制，而對(duì)移取不同蟲(chóng)齡的小幼蟲(chóng)育王所引起的蜂王發(fā)育，特別是生殖發(fā)育的差異研究甚少。
　　本研究以不同移蟲(chóng)日齡培育的蜂王及其幼蟲(chóng)為研究對(duì)象，分析不同移蟲(chóng)日齡蜂王幼蟲(chóng)4日齡JHⅢ滴度及9日齡Ecd滴度的差異，對(duì)不同移蟲(chóng)日齡所培育出的剛出房處女王繁殖相關(guān)性狀進(jìn)行檢測(cè)，并且應(yīng)用iTRAQ技術(shù)，研究不同移蟲(chóng)日齡對(duì)蜂王卵巢蛋白質(zhì)表達(dá)差異的影響，

2、以期闡明移蟲(chóng)日齡對(duì)蜂王生長(zhǎng)發(fā)育的調(diào)控機(jī)制。主要研究?jī)?nèi)容和結(jié)果如下:
　　1、通過(guò)液質(zhì)聯(lián)用的方法，分別測(cè)定了4日齡蜂王幼蟲(chóng)血淋巴JHⅢ和9日齡幼蟲(chóng)血淋巴Ecd的滴度。結(jié)果表明不同移蟲(chóng)日齡所培育的蜂王幼蟲(chóng)4日齡JHⅢ和9日齡Ecd滴度均存在顯著差異，且隨著移蟲(chóng)日齡的增加，蜂王幼蟲(chóng)血淋巴JHⅢ和Ecd滴度均顯著下降。
　　2、通過(guò)形態(tài)學(xué)和解剖學(xué)的方法對(duì)不同移蟲(chóng)日齡培育的處女王進(jìn)行相關(guān)指標(biāo)測(cè)定，結(jié)果表明不同移蟲(chóng)日齡所培育的處女王其初

3、生重、卵巢重、頭重及卵巢管數(shù)均存在顯著差異，且隨著移蟲(chóng)日齡的增加，蜂王的初生重、卵巢重和頭重顯著減輕;蜂王的卵巢管數(shù)顯著減小;蜂王的初生重和卵巢管數(shù)呈線性正相關(guān)關(guān)系，相關(guān)系數(shù)r=0.82。研究結(jié)果表明，移蟲(chóng)日齡越小，幼蟲(chóng)獲得更好的生長(zhǎng)條件越早，越有利于蜂王個(gè)體發(fā)育尤其是繁殖性狀的發(fā)育，人工育王實(shí)踐中應(yīng)移取蟲(chóng)齡盡量小的幼蟲(chóng)。
　　3、對(duì)不同移蟲(chóng)日齡培育的蜂王卵巢組織蛋白質(zhì)進(jìn)行iTRAQ定量分析，共鑒定到的蛋白質(zhì)二級(jí)圖譜總數(shù)為4529

4、66個(gè)，最終獲得3642個(gè)蛋白。與1日齡移蟲(chóng)發(fā)育的蜂王相比，2日齡移蟲(chóng)發(fā)育的蜂王共發(fā)現(xiàn)424個(gè)差異蛋白，其中202個(gè)上調(diào)，222個(gè)下調(diào);3日齡移蟲(chóng)發(fā)育的蜂王共發(fā)現(xiàn)305個(gè)差異蛋白，其中98個(gè)上調(diào)，207個(gè)下調(diào)。GO富集結(jié)果表明，不同日齡移蟲(chóng)的蜂王卵巢組織蛋白在細(xì)胞代謝、分裂以及蛋白質(zhì)合成方面存在顯著差異。Pathway富集分析表明，1日齡移蟲(chóng)和2日齡移蟲(chóng)發(fā)育蜂王差異蛋白主要富集在代謝通路(24.17％)，包括碳水化合物代謝、脂代謝和外源