苦瓜葉片提取液對菜粉蝶各蟲期生長、發(fā)育及蛋白質(zhì)組分的影響.pdf

1、本文利用乙醚，丙酮，清水三種溶劑浸提苦瓜葉片，并分別采用10％、30％、50％三個不同濃度的提取液涂抹甘藍葉片飼喂菜粉蝶幼蟲——菜青蟲。比較觀察不同溶劑、不同濃度苦瓜葉片提取液(以下簡稱提取液)對菜青蟲生長、發(fā)育的影響，找出了最佳的提取液濃度，同時對菜粉蝶及蛹態(tài)進行蛋白質(zhì)雙向電泳分析。實驗結(jié)果表明菜青蟲取食了涂抹提取液的甘藍葉片后，其取食量明顯降低，行為遲鈍、形態(tài)卷曲，甚至死亡。以清水對照為準，不同溶劑提取液對幼蟲取食量、體重的影響，以

2、乙醚提取液影響最大，作用最強，其次是丙酮和清水；從卷曲率和死亡率來看：仍是乙醚提取液比丙酮、清水的高；當試蟲進入蛹期時，卷曲率和死亡率明顯提高；提取液對化蛹率和羽化率的影響均是乙醚提取液比丙酮和清水的低。無論哪一種溶劑提取液均對試蟲生長發(fā)育產(chǎn)生強烈的抑制和毒害作用。三種溶劑比較，以乙醚提取液處理的作用最強。 試驗表明10％、30％、50％三種濃度提取液對菜粉蝶各蟲態(tài)的影響是：每種濃度提取液都對試蟲生長、發(fā)育產(chǎn)生強烈的抑制和毒害作

3、用。三種濃度比較，以50％的濃度作用效果最強，而10％和30％的濃度作用效果無明顯差異。采用10％的提取液濃度有利于進一步研究提取液對試蟲下一代的長效影響和滿足本研究的連續(xù)性，同時也達到經(jīng)濟有效的目的。因此選取10％的濃度為最佳提取液濃度。 運用雙向電泳技術(shù)對試蟲蛹態(tài)進行了蛋白質(zhì)變化分析：與清水對照相比，經(jīng)過乙醚苦瓜葉片10％濃度提取液處理的試蟲，在化蛹初期誘導(dǎo)產(chǎn)生出四個蛋白組分，分子量和等電點為：66kD／pI5.5，23kD

4、／pI6.5，21kD／pI6.9，21kD／pI7.0，同時也有分子量和等電點為97kD／pI6.5，80kD／pI7.1，80kD／pI7.2，50kD／pI6.8，50kD)／pI7.1，50kD／pI7.2，30kD／pI6.3，30kD／pI6.5，28kD／pI6.3，23kD／pI7.0十個蛋白質(zhì)組分缺失；在致畸蛹中誘導(dǎo)產(chǎn)生分子量和等電點為97kD／pI6.7，97kD／pI 6.9，97kD／pI 7.3，21kD／pI

5、 7.5， 21kD／pI 6.0五個蛋白質(zhì)組分。在致死蛹中誘導(dǎo)產(chǎn)生分子量和等電點為21kD／pI5.9，21kD／pI 6.1，21kD／pI6.5，21kD／pI 6.7四個蛋白質(zhì)組分。以上這些蛋白質(zhì)組分的增加和缺失可能參與了試蟲體內(nèi)一些生化代謝變化的調(diào)控，與提取液作用有一定的相關(guān)性。 運用雙向電泳技術(shù)對畸形菜粉蝶進行了蛋白質(zhì)變化分析，結(jié)果表明：在蛋白質(zhì)圖譜中：畸形蝶蛋白質(zhì)圖譜與對照蛋白質(zhì)譜型相類似，兩圖譜之間較平行，均可

6、分辨出200個左右蛋白質(zhì)斑點，等電點處于pI4.5～pI7.5之間，分子量在14～94kD范圍，其中約有50個左右蛋白質(zhì)含量較豐富。與對照相比，在畸形蝶圖譜中缺失了兩個蛋白斑點，分別為：64kD/pI5.5，31kD/pI6.0。誘導(dǎo)產(chǎn)生出15個新的蛋白斑點，分子量和等電點為：43kD/pI7.0，38kD/pI6.5，31kD/pI7.1，31kD/pI7.2，29kD/pI5.2，25kD/pI5.1，25kD/pI6.1，22kD

7、/pI4.6，22kD/pI4.7，20kD/pI4.8，16kD/pI4.6，16kD/pI6.1，16kD/pI7.1，14kD/pI6.0，14kD／p16.8?？喙先~片提取液作為植物源生物農(nóng)藥具有持效性長，作用持久的特點，畸形蝶中蛋白質(zhì)組分的增加和缺失與蛹態(tài)中一樣可能參與了試蟲體內(nèi)一些生化代謝變化的調(diào)控，與提取液作用有一定的相關(guān)性。 運用電感耦合等離子體發(fā)射光譜儀對不同溶劑苦瓜葉片提取液常量及微量元素進行了分析：與對照組

8、比較，處理組元素含量有一定變化，元素Na、K、Ca、Sr、Ba的含量是清水>乙醚>丙酮；元素Mg、Mn、Fe、P的含量均是清水>丙酮>乙醚；元素Cu、Zn的含量是乙醚>丙酮>清水。 運用雙向電泳技術(shù)對不同溶劑苦瓜葉片提取液的蛋白質(zhì)進行分析，發(fā)現(xiàn)了不同的提取液中出現(xiàn)了一些特異的蛋白質(zhì)組分。在乙醚苦瓜葉片提取液中檢測到的蛋白質(zhì)斑點，其范圍為：97kD～38kD/pI5.5～7.1，與對照相比，在乙醚提取液中檢測到4個著色較深的蛋白質(zhì)