海南省椰心葉甲綠僵菌研究.pdf

1、本文研究結(jié)果如下： 1.對(duì)海南省部分市縣的椰樹(shù)進(jìn)行隨機(jī)取樣調(diào)查，由于各地區(qū)的防治工作、地形差異及氣候等共同影響，使椰心葉甲在各地發(fā)生危害程度有所不同，其中災(zāi)情最嚴(yán)重的是海口和三亞；同時(shí)，發(fā)現(xiàn)綠僵菌在各地對(duì)椰心葉甲均有寄生現(xiàn)象，但在自然環(huán)境中的寄生率偏低。 2.從野外采集椰心葉甲僵蟲(chóng)進(jìn)行分離，利用馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基，對(duì)該菌進(jìn)行了分離培養(yǎng)。對(duì)不同生長(zhǎng)發(fā)育天數(shù)的菌落特征即顏色、大小、孢子堆的形成等特點(diǎn)進(jìn)行了描述。在光學(xué)顯微

2、鏡下觀察了菌絲的形態(tài)，成熟孢子及分生孢子梗的形狀、顏色及連接狀況。經(jīng)培養(yǎng)特征和形態(tài)學(xué)鑒定，確定該昆蟲(chóng)病原真菌是綠僵菌屬的真菌。 3.測(cè)定了不同地理來(lái)源的8個(gè)綠僵菌菌株rDNA-ITS序列，對(duì)8個(gè)菌株的ITS進(jìn)行了克隆和測(cè)序，并將之與GenBank已登錄的ITS序列進(jìn)行比較，發(fā)現(xiàn)與金龜子綠僵菌小孢變種(Metarhiziumanisopliaevar.anisopliae)有很高的同源性，達(dá)到94.2％，且測(cè)出全長(zhǎng)為547bp，說(shuō)

3、明8個(gè)菌株是金龜子綠僵菌小孢變種；并與其它不同變種綠僵菌菌株的rDNA-ITS序列一起進(jìn)行系統(tǒng)發(fā)育分析，所構(gòu)建的系統(tǒng)發(fā)育樹(shù)將其中8個(gè)菌株聚在金龜子綠僵菌小孢變種分支上，從而在分子水平上確定了分離菌株為金龜子綠僵菌小孢變種。 4.測(cè)定了8株綠僵菌的生物學(xué)特性，結(jié)果表明：綠僵菌在以玉米粉作碳源，牛肉膏、蛋白胨作氮源的條件下菌絲的生長(zhǎng)速率最快，產(chǎn)孢量最高；綠僵菌對(duì)溫度和pH的適應(yīng)范圍較廣，最適宜的生長(zhǎng)溫度是26～28℃；pH為6～7時(shí)

4、，菌絲生長(zhǎng)最快，孢子量最多。55℃，處理10分鐘，菌絲失去生長(zhǎng)能力、不能長(zhǎng)成菌落，表明，綠僵菌的致死溫度為55℃。 5.測(cè)定了不同菌株、不同孢子懸浮液濃度對(duì)椰心葉甲的致死中時(shí)LT50，進(jìn)行相關(guān)分析和回歸分析，致病性測(cè)定結(jié)果表明，不同來(lái)源的綠僵菌菌株對(duì)椰心葉甲致病力差異明顯：在相同濃度下處理椰心葉甲成蟲(chóng)、幼蟲(chóng)、蛹，結(jié)果顯示SY-2、WC-1、SX-2、HK-5等4個(gè)菌株對(duì)椰心葉甲各蟲(chóng)態(tài)的毒力效果均比QH-4、HY-4、YP-6、S