巴西橡膠樹HbbHLH轉(zhuǎn)錄因子的克隆及表達(dá)研究.pdf

1、天然橡膠是關(guān)系到國計民生的重要戰(zhàn)略物資，是不可缺少的工業(yè)原料之一，與煤炭、鋼鐵和石油并列為世界四大工業(yè)原料，而且是唯一一種可再生的原料。天然橡膠具有很強的彈性、良好的絕緣性、可塑性、耐磨、耐腐蝕、拉力好、隔水隔氣好等優(yōu)點，是合成橡膠所不能取代的，被廣泛的應(yīng)用于工業(yè)、農(nóng)業(yè)、國防、交通、運輸、機(jī)械制造、醫(yī)藥衛(wèi)生領(lǐng)域和日常生活等方面。 2001年中國取代美國成為世界上最大的天然橡膠消費國，到2010年天然橡膠消費量可能升至230萬噸，

2、超過3/4要依賴于進(jìn)口，天然橡膠生產(chǎn)形式十分嚴(yán)峻。巴西橡膠樹的乳管是合成與貯存膠乳的地方，也是決定橡膠產(chǎn)量的最重要的結(jié)構(gòu)成份，乳管分化是影響橡膠樹膠乳產(chǎn)量的三個主要因素之一。研究表明施茉莉酸及較茉莉酸濃度更高的茉莉酸生物合成的前體亞麻酸能夠誘導(dǎo)橡膠樹的次生乳管分化。在擬南芥、水稻和西紅柿等植物中，發(fā)現(xiàn)了許多響應(yīng)茉莉酸信號的bHLH家族轉(zhuǎn)錄因子基因，如JAMYC2，.JAMYC10，AtMYC2和BERJ1等，茉莉酸可誘導(dǎo)這些基因的表達(dá)。

3、大量MYC型bHLH轉(zhuǎn)錄因子主要在分生組織中表達(dá)，參與植物細(xì)胞分化和發(fā)育過程。所以，我們推斷，在橡膠樹皮中存在受茉莉酸誘導(dǎo)的調(diào)控乳管分化的bHLH轉(zhuǎn)錄因子基因。 本研究根據(jù)從膠乳中得到的bHLH轉(zhuǎn)錄因子的保守區(qū)設(shè)計EST引物，以樹皮總RNA為模板，應(yīng)用RACE技術(shù)克隆了橡膠樹皮HbbHLH轉(zhuǎn)錄因子基因，并對其進(jìn)行了生物信息學(xué)分析。在此基礎(chǔ)上，對該基因其進(jìn)行了Sourthem雜交分析，結(jié)果表明：該基因為多拷貝基因；運用半定量RT-