番茄NAC轉(zhuǎn)錄因子的克隆與表達分析.pdf

1、NAC家族轉(zhuǎn)錄因子是植物特有的轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子，在植物的生長發(fā)育、1生物脅迫和非生物脅迫應答過程中發(fā)揮重要的作用，是當前植物基因功能及表達網(wǎng)絡調(diào)控研究中的熱點。番茄是一種富含營養(yǎng)物質(zhì)的躍變型果實，是研究果實成熟的模式植物。目前對于NAC轉(zhuǎn)錄因子在果實成熟衰老中的作用和調(diào)控模式尚不清楚，因此課題從番茄中分離和研究NAC轉(zhuǎn)錄因子基因具有重要的意義。
　　本文首先利用生物信息學的方法分析番茄NAC轉(zhuǎn)錄因子結(jié)構(gòu)與特性。進一步篩選到與果實成熟相

2、關的基因，并通過 PCR方法研究其在不同組織、不同成熟階段、不同成熟類型果實和外源激素處理下的表達特性。最后利用VIGS技術(shù)沉默目的基因，深入闡明NAC對乙烯合成和信號通路中相關基因的作用。
　　主要研究成果如下：
　　(1)生物信息學分析。在番茄全基因組中分離到74個NAC轉(zhuǎn)錄因子（SlNAC1-74），對其基因和編碼蛋白的結(jié)構(gòu)和理化性質(zhì)進行分析，并預測其生物功能。篩選到與果實發(fā)育成熟相關的SNAC4-9作為本文研究的目的

3、基因。
　　(2)基因表達分析。SNAC4-9基因參與番茄的生長發(fā)育和成熟衰老進程。外源ABA、SA和乙烯處理一定程度促進SNAC基因的表達，NAC轉(zhuǎn)錄因子在乙烯通路中受到RIN、Gr蛋白的調(diào)控作用。研究顯示，SNAC基因在番茄果實中具有差異表達特性，并暗示SNAC基因通過乙烯信號傳導途徑參與對番茄果實成熟發(fā)育的調(diào)控過程。
　　(3) VIGS技術(shù)分析。成功構(gòu)建TRV-SNAC重組病毒載體，并應用VIGS技術(shù)沉默番茄果實中S