蒸發(fā)光散射檢測器在復(fù)雜中藥檢測中的應(yīng)用及與毛細管分離系統(tǒng)聯(lián)用的研究.pdf

1、隨著中藥現(xiàn)代化研究的不斷深入,對分離分析技術(shù)的要求逐步升級,對分析檢測方法的多樣性與先進性也提出了巨大挑戰(zhàn)。單種中藥所含化學(xué)成分可能有百余種,并且隨著研究的發(fā)展還可能不斷有新的化學(xué)成分被發(fā)現(xiàn)。對于中藥復(fù)方,在炮制煎煮過程中還可能產(chǎn)生出新的成分,因此中藥的質(zhì)量控制是非常復(fù)雜的問題。蒸發(fā)光散射檢測器(Evaporative light scattering detector, ELSD)作為一款通用的檢測器,可檢測揮發(fā)性低于流動相的任何樣品

2、,具有廣泛的梯度和溶劑兼容性,尤其在植物藥質(zhì)量控制、食品安全等領(lǐng)域更具優(yōu)勢。目前,世界上植物藥,或者稱為更廣泛意義上的天然藥物的復(fù)興方興未艾,是全球“綠色”浪潮的組成部分。銀杏葉片藥物在國際上廣泛使用,它是現(xiàn)代植物藥的典型代表,也是第一個現(xiàn)代植物藥,標志著現(xiàn)代植物藥的開始。鑒于紫外(UV)檢測手段也屬高度靈敏的檢測手段之一,本研究的一部分即將紫外的靈敏與蒸發(fā)光散射檢測的通用互補結(jié)合,搭建了新型的雙檢測器平臺,對復(fù)雜中藥系統(tǒng)銀杏葉提取物及

3、其中重要組分萜類內(nèi)酯進行分離分析鑒定,并在此基礎(chǔ)上發(fā)展了雙重指紋圖譜的解析方法。另一方面,儀器微型化已成為當前分析儀器及方法的一個重要發(fā)展方向,在生物醫(yī)學(xué)、高通量藥物合成篩選等方面有著廣闊的前景。本研究初步考察了微型化噴霧方式。將微流蒸發(fā)光散射檢測器與毛細管分離系統(tǒng)聯(lián)用,進行復(fù)雜中藥系統(tǒng)銀杏葉提取物及其分散片制劑、其中萜類內(nèi)酯與黃酮類物質(zhì)的分離檢測。這種方法擴大了毛細管液相色譜(cLC)、加壓毛細管電色譜(pCEC)的應(yīng)用范圍,使微流蒸

4、發(fā)光散射檢測器與毛細管分離系統(tǒng)的聯(lián)用成為解決復(fù)雜樣品分離分析強有力的工具。本研究分為五個部分：
　　第一章綜述了蒸發(fā)光散射檢測器的基本原理、檢測步驟及應(yīng)用優(yōu)勢。同時介紹了復(fù)雜中藥系統(tǒng)銀杏葉提取物、中藥指紋圖譜質(zhì)量控制的相關(guān)背景。此外總結(jié)了毛細管分離系統(tǒng)及相關(guān)檢測器聯(lián)用研究,并詳述了與蒸發(fā)光散射檢測器相近檢測原理的另一種光散射檢測器-冷凝光散射檢測器與毛細管分離體系聯(lián)用的研究進展。
　　第二章搭建了HPLC-UV-ELSD雙重

5、檢測器平臺,將紫外的靈敏與蒸發(fā)光散射檢測的通用互補結(jié)合,對復(fù)雜中藥系統(tǒng)銀杏葉提取物及其中重要組分萜類內(nèi)酯(銀杏內(nèi)酯A、銀杏內(nèi)酯B、銀杏內(nèi)酯C及白果內(nèi)酯)進行分離分析鑒定。優(yōu)化溶劑提取條件為70/30(v/v)甲醇/水,體系超聲60 min;優(yōu)化色譜條件為:溶劑A(0.05％aqueous TFA)與溶劑B(異丙醇),梯度條件:5-20%溶劑B,0-50 min,保持20%B至80 min。
　　第三章研究嘗試了一種有效、成功的雙重

6、指紋圖譜分析方法。首先有效分離全國十產(chǎn)地(陜西、北京、山東、浙江、廣東、江蘇、天津、湖南)銀杏葉提取物。其次采用中藥色譜指紋分析相似度評價系統(tǒng)對次十個產(chǎn)地來源的藥材進行相似度分析,分別建立UV與ELSD檢測器各自的對照指紋圖譜。采用SPSS軟件進行主成分分析與聚類分析,采用可視化與直觀的3D曲線圖表征各產(chǎn)地藥材區(qū)別信息。最后合并單個檢測指紋圖譜進行分析,為復(fù)雜中藥銀杏葉提取物的質(zhì)量控制提供了一種更全面的信息獲取方式。
　　第四章分

7、別初步考察了微型化噴霧方式中的電噴霧與氣動噴霧方式。搭建離線電噴霧平臺,通過考察不同噴霧管材質(zhì)、10種噴針位置、6種噴針內(nèi)徑、5種電極模式,對離線噴霧距離進行表征,為電噴霧方式在微型化ELSD微型化中的應(yīng)用做了鋪墊。此外采用最新研制的微流蒸發(fā)光散射檢測器,通過縮小不銹鋼套管與毛細管噴針的間隙由40μm至25μm,有效減小載氣流量至1 L/min以下,且樣品響應(yīng)信噪比得到提高。通過提高漂移管溫度與載氣流量,增大有機相比例,可提高信噪比,減