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文檔簡介
1、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?(1)嘗試在硅磷酸鈣(C3S+MCPM)系骨水泥中添加β-焦磷酸鈣(β-Ca2P2O7,β-CPP),以期能夠調(diào)節(jié)其固化時(shí)間,改善其降解性與生物活性。(2)評價(jià)骨水泥對體外培養(yǎng)的MC3T3-E1細(xì)胞的毒性和影響,并對相關(guān)基因表達(dá)水平進(jìn)行了研究。
實(shí)驗(yàn)方法:(1)用吉爾摩(Gilmore)雙針法測定復(fù)合骨水泥的固化時(shí)間;采用模擬體液(SBF)浸泡實(shí)驗(yàn)測定骨水泥的生物學(xué)活性。通過浸提液的pH值及其不同時(shí)間降解率的變化,并
2、結(jié)合SEM和XRD對其微觀結(jié)構(gòu)進(jìn)行觀察,描述β-CPP的添加對骨水泥理化性質(zhì)的影響及規(guī)律;(2)通過實(shí)時(shí)定量PCR對MC3T3-E1細(xì)胞E型細(xì)胞周期蛋白(CyclinE1)及增殖細(xì)胞核蛋白Ki67的表達(dá)水平進(jìn)行定量分析,并與MTT法做對比,旨在探討該復(fù)合材料的體外生物相容性。
實(shí)驗(yàn)結(jié)果:(1)隨著復(fù)合材料中β-CPP含量的增大,固化時(shí)間增加。(2)復(fù)合材料具有良好的降解性,而且隨著β-CPP百分比的增大,骨水泥的降解率上升。復(fù)
3、合骨水泥浸泡過程中pH值一直保持在9.5-8.0之間。(3)MTT結(jié)果表明,濃度為12.5mg·mL-1~100mg·mL-1時(shí)實(shí)驗(yàn)組浸提液對MC3T3-E1細(xì)胞沒有明顯的毒性作用,一定濃度的含β-CPP骨水泥的浸提液能刺激細(xì)胞的增殖。(4)實(shí)時(shí)定量PCR結(jié)果顯示,不含β-CPP骨水泥不同濃度的浸提液培養(yǎng)6h后,MC3T3-E1細(xì)胞CyclinE1和Ki67mRNA水平與對照組相比僅有少量提高;添加55%wtβ-CPP的骨水泥上述2個(gè)基
4、因mRNA水平均顯著增高。其中CyclinE1mRNA水平在浸提液濃度為50mg·mL-1和25mg·mL-1時(shí),分別比對照組增加了90.18%和120.26%;Ki67mRNA水平在同樣的濃度時(shí)分別比對照組增加了31.48%和41.61%。
實(shí)驗(yàn)結(jié)論:添加β-CPP使(C3S+MCPM)系骨水泥的固化時(shí)間延長,降解速率增加,細(xì)胞增殖率和基因表達(dá)量也得到一定提高。結(jié)果提示,制備的這種含β-CPP的硅磷酸鈣復(fù)合骨水泥具有良好的生
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