支氣管哮喘α防御素的表達(dá)及P2Y2受體對(duì)其調(diào)節(jié)作用的研究.pdf

1、背景：中性粒細(xì)胞在支氣管哮喘中受到廣泛重視，其通過(guò)脫顆粒及釋放炎性因子等參與氣道炎癥反應(yīng)，但機(jī)制仍不完全清楚。α防御素是主要存在于中性粒細(xì)胞內(nèi)的一類陽(yáng)離子抗菌肽。研究報(bào)道，作用于中性粒細(xì)胞膜表面P2Y2受體促進(jìn)中性粒細(xì)胞脫顆粒參與炎癥反應(yīng)。
　　目的：探討α防御素在支氣管哮喘中表達(dá)情況及P2Y2受體對(duì)其影響。
　　方法：①72只健康雄性豚鼠隨機(jī)分為對(duì)照組（C）、哮喘組（A）；卵蛋白致敏復(fù)制哮喘豚鼠模型，用生理鹽水替代卵蛋白作

2、為對(duì)照組；再將對(duì)照組和哮喘組分成：生理鹽水組（C1/A1）、ATP干預(yù)組（C2/A2）、蘇拉明干預(yù)組（C3/A3），分別腹腔注射生理鹽水、ATP25mg/kg及蘇拉明7.5mg/kg，20小時(shí)后獲取標(biāo)本，檢測(cè)支氣管肺泡灌洗液（BALF）細(xì)胞總數(shù)并對(duì)嗜酸性粒細(xì)胞及中性粒細(xì)胞計(jì)數(shù)；檢測(cè)豚鼠血漿中白介素-8（IL-8）和α防御素（RNP）及肺組織中P2Y2和RNPmRNA表達(dá)水平。②選取支氣管哮喘急性發(fā)作期患者和健康志愿者外周血分離中性粒細(xì)胞

3、作為標(biāo)本，分別進(jìn)行干預(yù)后培養(yǎng)（P2Y2受體誘導(dǎo)劑ATP和拮抗劑蘇拉明）；檢測(cè)細(xì)胞上清液中IL-8，HNP1-3以及中性粒細(xì)胞中P2Y2受體蛋白及mRNA表達(dá)水平。
　　結(jié)果：⑴A1組 BALF中細(xì)胞總數(shù)、嗜酸性粒細(xì)胞及中性粒細(xì)胞數(shù)目顯著多于C1組(P<0.05)；A1組BALF中細(xì)胞總數(shù)及中性粒細(xì)胞數(shù)目與A3組比較亦增多，較A2組降低(P<0.05)；C組組內(nèi)比較，無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05）。⑵A1組豚鼠血漿和肺組織中RNP蛋白

4、及mRNA表達(dá)較C1組增高，與A2組比較降低，較A3組增高(P<0.05）；C1組較C2組比較降低，與C3組比較增高（P<0.05）。⑶A1組豚鼠血漿中IL-8表達(dá)較C1組增高，與A2組比較降低，較A3組增加（P<0.05）；C組組內(nèi)比較，無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05）。⑷P2Y2mRNA表達(dá)結(jié)果與其干預(yù)有關(guān)。C1組和A1組肺組織P2Y2 mRNA表達(dá)較其各自ATP干預(yù)組降低，與蘇拉明干預(yù)組比較增高（P<0.05）；A1組肺組織P2Y2m

5、RNA表達(dá)較C1組增高（P<0.05）。⑸哮喘組患者分離培養(yǎng)中性粒細(xì)胞中HNP1-3蛋白及mRNA表達(dá)較對(duì)照組增高，與哮喘ATP干預(yù)組比較降低，較哮喘蘇拉明干預(yù)組增高(P<0.05）；對(duì)照組較其ATP干預(yù)組比較降低，與蘇拉明干預(yù)組比較增高（P<0.05）。⑹哮喘組分離的中性粒細(xì)胞P2Y2mRNA及蛋白、IL-8表達(dá)較正常組增高（P<0.05）。⑺P2Y2mRNA及蛋白表達(dá)結(jié)果與其干預(yù)有關(guān)，正常組和哮喘組分離的中性粒細(xì)胞P2Y2mRNA及