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1、目的:通過(guò)在比格犬脛骨干骺端建立骨缺損動(dòng)物模型,同期在骨缺損區(qū)分別植入重組人骨形成蛋白-2(rhBMP-2)與珊瑚羥基磷灰石(CHA)的復(fù)合物、富血小板纖維蛋白(PRF)與珊瑚羥基磷灰石的復(fù)合物、自體骨與珊瑚羥基磷灰石的復(fù)合物及單純珊瑚羥基磷灰石(對(duì)照),比較這四種骨移植材料在骨缺損中的成骨效能,為它們的臨床應(yīng)用提供理論依據(jù)和操作指導(dǎo)。
方法:選用6只比格犬,在其雙側(cè)脛骨干骺端分別制造四個(gè)相同的直徑為6mm、深為5mm的骨缺損
2、;四個(gè)骨缺損隨機(jī)分為A、B、C、D組,同期在4組骨缺損中分別植入rhBMP-2/CHA、PRF/CHA、自體骨/CHA、CHA;術(shù)后第2、4、8、12周于比格犬頸部皮下分別注射鹽酸四環(huán)素,鈣黃綠素,茜素紅,二甲酚橙行熒光標(biāo)志;12周后處死6只比格犬,取材;行大體標(biāo)本觀察,比較四組植骨區(qū)骨生長(zhǎng)情況;拍牙科 CT,觀察比較四組植骨區(qū)新生骨骨密度情況;制作脫鈣石蠟切片,HE染色,光學(xué)顯微鏡下觀察各植骨區(qū)新生骨的組織學(xué)特點(diǎn),測(cè)量、比較12周后四
3、組植骨區(qū)新骨的形成量;制作不脫鈣硬組織磨片,熒光顯微鏡下觀察各植骨區(qū)熒光標(biāo)記情況,測(cè)量、比較各植骨區(qū)在不同時(shí)段的熒光標(biāo)記率,即新骨形成量,測(cè)量不同熒光帶間的垂直距離,計(jì)算、比較不同時(shí)段四組植骨區(qū)新骨的平均礦化沉積速率。
結(jié)果:1.6只比格犬術(shù)后均無(wú)死亡,術(shù)區(qū)無(wú)感染,飲食、活動(dòng)正常;12周后,大體標(biāo)本見(jiàn)四組植骨區(qū)無(wú)明顯差異,骨生長(zhǎng)良好,骨缺損間隙均完全關(guān)閉,植骨區(qū)與宿主骨邊界尚清晰。
2.X線(xiàn)示:四組植骨區(qū)未見(jiàn)明顯成骨
4、不良的透射陰影,新生骨與天然骨連接緊密,各組密度影不全相同,自體骨/CHA組和PRF/CHA組骨密度較致密,rhBMP-2/CHA組致密性低于前兩者,CHA組未見(jiàn)明顯骨致密影。
3.脫鈣石蠟切片HE染色后組織學(xué)觀測(cè):術(shù)后12周,四組植骨區(qū)未見(jiàn)明顯組織壞死和炎癥細(xì)胞浸潤(rùn),均有不同程度的新生骨組織及未降解的骨粉;新生骨與宿主骨連接緊密,未見(jiàn)明顯界限;新生骨小梁不規(guī)則,粗細(xì)不一,排列無(wú)序;與CHA組相比,其他三組植骨區(qū)新生骨小梁更密
5、集、粗大,連續(xù)性更好;12周后,四組植骨區(qū)成骨量比較:自體骨/CHA組>PRF/CHA組>rhBMP-2/CHA組>CHA組。
4.硬組織磨片觀察:四組植骨區(qū)均可見(jiàn)橙黃色熒光帶,即術(shù)后2周內(nèi)均有新骨形成,四組植骨區(qū)在術(shù)后2周內(nèi)新骨形成量比較:自體骨/CHA組> PRF/CHA組≈rhBMP-2/CHA組>CHA組;各植骨區(qū)均可見(jiàn)綠色熒光帶,且均比自身的橙黃色熒光帶要多,即術(shù)后2~4周四組骨移植材料的成骨能力提高了,四組植骨區(qū)在
6、2~4周時(shí)新骨形成量比較:自體骨/CHA組>PRF/CHA組≈rhBMP-2/CHA組>CHA組;各植骨區(qū)均可見(jiàn)紅色熒光帶,即各組新生骨量隨時(shí)間延長(zhǎng)不斷增加,四組植骨區(qū)在4~8周時(shí)新骨形成量比較:PRF/CHA組>自體骨/CHA組>PRF/CHA組>CHA組。四組植骨區(qū)在術(shù)后2~4周新骨的平均礦化速率比較:自體骨/CHA組>PRF/CHA組≈rhBMP-2/CHA組>CHA組;四組植骨區(qū)在術(shù)后4~8周新骨的平均礦化速率比較:PRF/CH
7、A組>自體骨/CHA組>rhBMP-2/CHA組>CHA組。
結(jié)論:1.四組植骨區(qū)術(shù)后2周內(nèi)均有新骨形成,且隨著時(shí)間的延長(zhǎng),新生骨量增多。
2.三種復(fù)合型材料的成骨效應(yīng)均明顯優(yōu)于單獨(dú)使用珊瑚羥基磷灰石。
3.三種復(fù)合型材料中自體骨/CHA組的成骨效應(yīng)最好,其次為PRF/CHA組,rhBMP-2/CHA組最差。
4.自體骨/CHA組在植入后前4周成骨效應(yīng)最好,之后逐漸下降。
5.PRF/C
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