HMGB1對(duì)體外人肺動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞增殖、遷移和凋亡的影響.pdf

1、目的:觀察高遷移率族蛋白B1(HMGB1)對(duì)體外人肺動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞(HPASMC)增殖、遷移和凋亡的影響。
　　 方法:體外培養(yǎng)人肺動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞(HPASMC)至5～8代,然后開始實(shí)驗(yàn)。配制含不同濃度HMGB1(0ng/ml、1ng/ml、10ng/ml、100ng/ml和1000ng/ml)的培養(yǎng)液,體外分別培養(yǎng)24小時(shí)和48小時(shí)后,用四甲基偶氮唑藍(lán)(MTT)法檢測不同濃度的HMGB1對(duì)HPASMC細(xì)胞生長增殖率的影響。利用

2、Boydend小室法檢測穿膜細(xì)胞數(shù),觀察含不同濃度HMGB1的無血清培養(yǎng)基對(duì)HPASMC體外培養(yǎng)20小時(shí)的趨化作用。用TUNEL法檢測不同濃度HMGB1對(duì)HPASMC作用48小時(shí)后細(xì)胞凋亡情況的影響。
　　 結(jié)果:(1)MTT法檢測顯示HMGB1對(duì)HPASMC細(xì)胞作用24小時(shí)或48小時(shí)后,與陰性對(duì)照組相比,實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞增殖率明顯升高,隨著HMGB1濃度增加,細(xì)胞增殖率升高(P＜0.01),并在HMGB1濃度為100ng/ml時(shí)達(dá)到

3、平臺(tái),且經(jīng)HMGB1處理48小時(shí)后細(xì)胞增殖率高于24小時(shí)對(duì)應(yīng)濃度組(P＜0.05)。(2)Boyden小室法趨化實(shí)驗(yàn)顯示隨著HMGB1濃度升高,穿膜細(xì)胞數(shù)增加(P＜0.01),且HMGB1濃度為100ng/ml時(shí)趨化作用達(dá)到峰值,HMGB1濃度為1μg/ml時(shí)趨化作用略減弱。(3)TUNEL法檢測細(xì)胞凋亡結(jié)果顯示,不同濃度HMGB1(0ng/ml、1ng/ml、10ng/ml、100ng/ml和1000ng/m1)干預(yù)48小時(shí)后,對(duì)照組