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文檔簡介
1、目的:目前全世界約有3.5億慢性乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)感染者,約占全球人口的6%,我國作為乙肝的多發(fā)流行區(qū),占全球HBV表面抗原總攜帶率的近50%,且60%的人受過HBV的感染[1]。慢性乙型肝炎是由HBV感染而致病的炎癥性疾病。病發(fā)時,機體內(nèi)骨髓、肝臟、淋巴結(jié)和脾臟中的巨噬細胞含量增高,淋巴組織中的B淋巴細胞和T淋巴細胞增殖分化,這些免疫細胞釋放趨化因子和細胞因子,在抗病毒的同時造成局部長期的炎癥反
2、應(yīng),由此可見炎癥性的免疫細胞、趨化因子和細胞因子在乙型肝炎的發(fā)生發(fā)展過程中發(fā)揮著重要的作用。
天然免疫系統(tǒng)要依賴模式識別受體識別入侵的外源病原微生物,然后將其清除掉。哺乳動物主要具有兩類微生物識別系統(tǒng),一類是膜結(jié)合受體,如Toll樣受體[2],存在于細胞膜和細胞器室膜上,識別胞外微生物,然后活化細胞內(nèi)信號來激發(fā)機體的免疫反應(yīng);另一類是細胞質(zhì)中的模式識別受體,包括NOD樣受體和具有螺旋酶結(jié)構(gòu)域的抗病毒蛋白RIG-1和MDA5,在
3、病毒感染過程中,這些分子可識別病毒的DNA或RNA,在機體抗病毒的免疫應(yīng)答中發(fā)揮著十分重要的作用。本研究旨在考察表達在細胞質(zhì)中模式識別受體(NOD1、NOD2、RIG1、MDA5)、Ⅰ型干擾素及促炎癥細胞因子和趨化因子等在慢性乙型肝炎患者外周血單個核細胞和血清中的表達情況。
方法:
1收集2012年11月-2014年1月之間來河北省衡水市哈勵遜國際和平醫(yī)院就診的慢性乙型肝炎患者為實驗組,共計34例,收集健康人40例為
4、實驗對照組。
2采集實驗組和對照組的新鮮空腹抗凝血,分離單個核細胞,提取單個核細胞中RNA,并反轉(zhuǎn)錄為cDNA,應(yīng)用實時定量PCR技術(shù)檢測NOD1、NOD2、 RIG1、MDA5、IFN-α、IFN-β、IL-8、IL-6、IRF-7、CXCL1和CXCL2的mRNA水平。
收集實驗組和對照組的血清,采用ELISA法測定IL-17和IFN-α的蛋白質(zhì)含量。
結(jié)果:與正常對照組比較,實驗組的NOD1、NOD2
5、、RIG1、MDA5、IRF-7、IFN-α、IFN-β、IL-8、IL-6、CXCL1、CXCL2的mRNA水平均明顯升高,具有顯著性差異,P<0.05。其中IFN-β的mRNA平均表達量為正常對照組的596倍,IFN-α、CXCL2、IRF-7和NOD1四項的mRNA表達水平分別為正常對照組的512倍、451倍、275倍和249倍。
與正常對照組比較,實驗組的IL-17和IFN-α的蛋白質(zhì)水平也明顯升高,具有顯著性差異,P
6、<0.05。
結(jié)論:慢性乙肝患者的細胞質(zhì)內(nèi)模式識別受體NOD1、NOD2、RIG-1和MDA5,轉(zhuǎn)錄因子IRF7,抗病毒的細胞因子IFN-α和IFN-β,促炎癥細胞因子IL-6,以及趨化因子IL-8、CXCL1和CXCL2的mRNA水平與健康人相比較,測定水平均顯著升高.Th17型細胞因子IL-17和抗病毒的細胞因子IFN-α的蛋白質(zhì)水平與健康人相比較,測定水平也顯著升高,這些結(jié)果提示:細胞質(zhì)內(nèi)模式識別受體可能在慢性乙型肝炎的
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